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鸡繁殖性状相关基因功能分析及卵巢转录组和miRNAs鉴定

发布时间:2023-02-18 21:05
  我国地方家禽遗传资源非常丰富,分别具有特色的优良性状,但繁殖性能普遍较低,成为制约其产业化开发的瓶颈之一。运用传统育种手段,经过长期的持续选择,家禽繁殖性状的选育上已经获得重要的遗传进展,有些品种甚至已接近生理极限。随着分子生物学技术的快速发展,筛选与繁殖性状紧密相关的分子标记或功能基因,为这些性状的选择提供了新的、快捷的途径。 本研究以山东地方鸡种为研究对象,采用直接测序、PCR-RFLP、RT-PCR和第二代Solexa测序技术,从DNA水平、mRNA水平以及全基因转录组和miRNA水平对鸡繁殖性状的遗传机制进行深入研究。 一、VLDLR、BMPR-IB和BMP15基因的多态性与遗传效应 选择山东3个地方鸡种(济宁百日鸡、汶上芦花鸡、莱芜黑鸡)和海兰褐蛋鸡为实验动物,共计1536只,分别检测VLDLR、BMPR-IB和BMP15基因的多态性,并分析与济宁百日鸡繁殖性状的相关性。 VLDLR基因检测到4个SNPs位点:分别是内含子1内的C2500T (V2500)、外显子6内G8467A (V8467)、内含子15内G12321A (V12321)和内含子17内A13876G(V13...

【文章页数】:132 页

【学位级别】:博士

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中文摘要
summary
文献综述
    1 影响鸡繁殖性状的因素
        1.1 光照
        1.2 温度
        1.3 饲料营养
        1.4 遗传因素
    2 影响鸡繁殖性状的相关基因
        2.1 极低密度脂蛋白受体
        2.2 骨形态发生蛋白受体IB
        2.3 骨形态发生蛋白 15
    3 关于miRNA
        3.1 miRNA的发现
        3.2 miRNA的命名
        3.3 miRNA的特征
        3.4 miRNA的生物合成机制
        3.5 miRNA的作用机制及其功能
        3.6 miRNA在家禽中的相关研究
    4 本研究的目的和意义
第一章 VLDLR、BMPR-IB和BMP15 基因多态性与遗传效应分析
    前言
    1 试验材料
        1.1 实验群体
        1.2 主要仪器设备
        1.3 主要药品和限制性内切酶
        1.4 主要试剂及配制
        1.5 主要数据库及分析软件
    2 试验方法
        2.1 性状测定记录
        2.2 血液基因组DNA抽提
        2.3 DNA池构建
        2.4 引物信息
        2.5 基因型分析
        2.6 DNA片段的克隆测序
        2.7 单倍型构建及关联分析
    3 结果与分析
        3.1 基因组DNA的提取
        3.2 VLDLR基因多态位点与繁殖性状关联分析
        3.3 BMPR-IB基因多态位点与繁殖性状关联分析
        3.4 BMP15 基因多态位点与繁殖性状关联分析
    4 讨论
    5 结论
第二章 VLDLR、BMPR-IB和BMP15 基因的表达分析
    前言
    1 试验材料
        1.1 试验群体
        1.2 主要仪器设备
        1.3 主要试剂
    2 试验方法
        2.1 性状测定记录
        2.2 样本总RNA抽提
        2.3 RNA质量检测
        2.4 反转录
        2.5 RealTimePCR
    3 结果与分析
        3.1 总RNA电泳图
        3.2 荧光定量PCR扩增的标准曲线及溶解曲线
        3.3 鸡VLDLR基因表达规律
        3.4 鸡BMP15 基因表达规律
        3.5 鸡BMPR-IB基因表达规律
    4 讨论
    5 结论
第三章 高、低产汶上芦花鸡卵巢组织的转录组分析
    前言
    1 试验材料
    2 试验方法
        2.1 卵巢组织总RNA制备提取
        2.2 高、低产鸡卵巢组织转录组测序技术路线
        2.3 转录组测序数据分析流程
    3 结果与分析
        3.1 RNA质量检测
        3.2 原始测序数据产出量
        3.3 获得基因的GO注释及分类统计
        3.4 获得基因的pathway注释分析
        3.5 差异表达基因
        3.6 基因差异基因的GO注释及分类统计
    4 讨论
    5 结论
第四章 高、低产汶上芦花鸡卵巢差异表达miRNAs分析
    前言
    1 试验材料
    2 试验方法
        2.1 卵巢组织总RNA制备提取
        2.2 小RNA测序技术路线
        2.3 小RNA测序数据分析流程
    3 结果与分析
        3.1 RNA质量检测
        3.2 原始测序数据产出量
        3.3 序列长度分布统计
        3.4 Clean reads的碱基偏好
        3.5 NcRNA的过滤去除
        3.6 高、低产卵巢组织中的miRNAs分析
        3.7 高、低产卵巢组织中的差异表达miRNAs分析
    4 讨论
    5 结论
第五章 全文结论
    1 结论
    2 有待解决的问题
参考文献
作者简历
导师简介
致谢



本文编号:3745531

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