基于沙门菌SpiC蛋白间接ELISA检测方法的建立及应用

发布时间：2023-02-19 18:07

　　沙门菌是一种重要的人兽共患病原菌,不仅可以感染畜禽,而且还可以感染人类。鸡白痢沙门菌、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌等血清型的沙门菌感染鸡后可以引起鸡沙门菌病,导致鸡的隐性带菌感染,甚至引起鸡的死亡,给养禽业带来巨大的经济损失。同时,沙门菌也是食源性致病菌之一,食用被沙门菌感染或污染的畜禽产品可能导致人类患上沙门菌病,出现腹泻、呕吐、败血症等症状,严重危害人类的健康。因此,必须建立有效的沙门菌检测方法,以控制沙门菌在鸡中的传播。通过检测鸡血清中的沙门菌抗体含量是判定沙门菌感染的重要方法之一。长期以来,在鸡的养殖环节中,玻板凝集试验常常被用来检测鸡血清中的沙门菌抗体,但是该方法敏感性低,易导致沙门菌抗体的漏检。传统的玻板凝集试验不能满足鸡沙门菌抗体的高效、全面检出,因此,发展一种新型的鸡沙门菌抗体检测方法显得十分必要。沙门菌SpiC蛋白是广泛存在于沙门菌中的保守蛋白,具有作为检测沙门菌感染的靶抗原的潜力。本研究建立了基于沙门菌SpiC蛋白的间接ELISA检测方法,并对其进行了初步应用。利用IPTG诱导重组菌Ecoli BL21(DE3)(pET-spiC)表达His-SpiC蛋白,并通过亲和层...

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
符号或缩写说明
文献综述
    1 沙门菌简介
    2 沙门菌的流行
    3 沙门菌病的危害
    4 沙门菌的致病机制
    5 SpiC蛋白致病机制
    6 常见沙门菌检测技术和方法
        6.1 抗原检测技术和方法
        6.2 抗体检测技术和方法
    7 本研究的目的和意义
    参考文献
1 材料
    1.1 菌株、血清
    1.2 主要试剂
    1.3 主要耗材
    1.4 主要仪器设备
    1.5 实验动物
2 方法
    2.1 表达纯化重组蛋白His-SpiC
    2.2 制备血清
    2.3 检测不同血清型沙门菌感染小鼠后血清中的沙门菌抗体
    2.4 间接ELISA方法的建立和优化
    2.5 间接ELISA方法的验证
    2.6 间接ELISA方法的初步应用
3 结果
    3.1 His-SpiC蛋白表达纯化的结果
    3.2 制备沙门菌阳性血清的结果
    3.3 检测不同血清型沙门菌感染小鼠后血清中的沙门菌抗体
    3.4 间接ELISA方法的建立和优化
    3.5 间接ELISA方法的验证
    3.6 间接ELISA方法初步应用
4 讨论
参考文献
致谢
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本文编号：3746704