犬腺病毒CAV-BJ02株的分离与鉴定

发布时间：2023-02-20 21:51

　　本研究旨在分离犬腺病毒(CAV)的北京地区流行株,采集北京地区某宠物医院2～4月龄发生咳嗽等呼吸道症状犬的鼻咽拭子,经胶体金和PCR检测,初筛为犬腺病毒阳性。经过处理后,将其处理液接种于MDCK细胞,进行连续传代培养,出现变圆、脱落、葡萄串样等特征性细胞病变。通过形态学观察、PCR鉴定及动物回归试验等方法对其进行鉴定。PCR扩增片段测序结果表明,该分离株为犬腺病毒Ⅱ型,遂将其命名为CAV-BJ02(GenBank:MN744708)株。用Reed-Muench法测得CAV-BJ02株的TCID₅₀为10^6.7·(100μL)^-1。电镜下可清晰地观察到呈正六边形的二十面体、直径在86 nm左右的犬腺病毒颗粒。遗传进化分析结果表明,本株病毒为CAV-Ⅱ型。动物回归试验结果表明,CAV-BJ02株可引起犬发热等轻微临床症状,以口鼻分泌物为主要排毒方式,排毒期为5～6 d,不导致犬死亡。上述研究结果为深入了解北京地区CAV的流行情况,为犬腺病毒病的诊断、防治及后续相关研究奠定了理论基础。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 细胞及主要试剂
    1.2 样本的采集及处理
    1.3 病毒的分离、传代及滴度测定
    1.4 病毒的PCR鉴定
    1.5 病毒的电镜观察
    1.6 遗传演化分析
    1.7 动物回归试验
2 结 果
    2.1 病毒分离培养
    2.2 PCR鉴定
    2.3 电镜观察
    2.4 遗传进化分析
    2.5 动物回归试验
        2.5.1 临床症状
        2.5.2 排毒情况观察
3 讨 论
4 结 论



本文编号：3747379