低浓度H 2 O 2 预处理对犬ADSCs抗凋亡能力的影响

发布时间：2023-02-26 08:06

　　为了探究低浓度过氧化氢(H₂O₂)预处理对犬脂肪间充质干细胞(ADSCs)抗凋亡能力的影响,试验采用流式细胞术鉴定干细胞表面标志物,诱导成骨分化、成脂分化鉴定干细胞分化能力,MTT Assay检测H₂O₂处理后细胞存活能力,Western-blot检测凋亡和抗氧化蛋白质[抗相关死亡促进因子(Bad)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl2)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶前体(Pro-caspase3)、剪切后含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cle-caspase3)、超氧化物歧化酶2(SOD2)]表达水平。结果表明:所提取细胞为ADSCs,提取的犬ADSCs具有良好的分化能力,可以分化成脂肪细胞及骨细胞。低浓度(1.5,2,2.5μmol/L)H₂O₂可以促进或显著促进细胞增殖(P<0.05或P<0.01),高浓度(15,25,35μmol/L)H₂O₂可以显著或极显著抑制细胞增殖(P<0.05或P<...

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【文章目录】：
1 材料
    1.1 样品来源
    1.2 主要试剂和仪器
2 方法
    2.1 ADSCs的分离培养
    2.2 ADSCs表面标志物的鉴定
    2.3 ADSCs多向分化潜能的鉴定
        2.3.1 ADSCs成脂分化及油红O染色
        2.3.2 ADSCs成骨分化及茜素红S染色
    2.4 不同浓度H2O2对犬ADSCs增殖的影响
    2.5 细胞凋亡的流式细胞术检测
    2.6 凋亡相关蛋白的Western-blot检测
    2.7 数据的统计分析
3 结果与分析
    3.1 原代ADSCs的形态观察
    3.2 犬ADSCs表面标志物的鉴定
    3.3 犬ADSCs多向分化潜能的鉴定
        3.3.1 犬ADSCs成脂分化
        3.3.2 犬ADSCs成骨分化
    3.4 不同浓度H2O2对犬ADSCs增殖的影响
        3.4.1 高浓度H2O2对犬ADSCs增殖的影响
        3.4.2 低浓度H2O2对犬ADSCs增殖的影响
    3.5 低浓度H2O2预处理对高浓度H2O2诱导犬ADSCs凋亡的影响
    3.6 低浓度H2O2预处理对 ADSCs 凋亡蛋白及抗氧化相关蛋白表达的影响
4 讨论



本文编号：3750159