鸡MHC基因多态性及其与抗马立克氏病的相关性研究
发布时间：2023-03-04 00:00
马立克氏病(Marek’s Disease, MD)是由具有高度传染性、致瘤性的疱疹病毒科马立克氏病毒引起的一种细胞结合性鸡淋巴组织增生性免疫抑制性传染病,对养禽业危害极大。 鸡的主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex, MHC)基因是由一组紧密连锁且高度多态的基因座组成的,参与体内外抗原呈递的遗传区域,在动物的免疫应答、免疫调控中扮演着重要角色。鸡的干扰素-γ (IFN-γ)基因是由感染病毒的细胞释放的一种细胞因子,干扰其他细胞病毒复制,对于机体的肿瘤发生、移植排斥反应、免疫调节及免疫系统的平衡至关重要,IFN-y基因具有诱导某些肿瘤细胞表达MHC Ⅰ类和MHCⅡ类抗原的作用,可促进此抗原诱导的自身T细胞数量的增加和CTL对肿瘤细胞的杀伤作用。家禽IFN-γ基因的表达量与其对马立克氏病的抗性密切相关。MHC基因的不同基因型对MD的抗性不同,主要表现在其对IFN-γ等细胞因子的表达调控程度的不同等方面。 本文对寿光鸡(SG)、济宁百日鸡(JB)、汶上芦花鸡(WL)、SPF白来航鸡(SPF)的MHC基因进行了遗传多样性分析,根据位于MHC ...
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
1 前言
1.1 马立克氏病的研究进展
1.2 MHC的性质和功能
1.2.1 MHC的命名与遗传学特性
1.2.2 MHC基因表达产物的分子结构
1.2.2.1 MHCⅠ类分子结构
1.2.2.2 MHCⅡ类分子结构
1.2.3 国内外家禽MHC的研究进展
1.2.4 主要组织相容性复合体与免疫抑制性肿瘤的研究进展
1.2.4.1 鸡主要组织相容性复合体与抗马立克氏病的相关研究
1.2.4.2 鸡主要组织相容性复合体与抗禽白血病的相关研究
1.2.4.3 鸡主要组织相容性复合体与抗禽网状内皮增生症的相关研究
1.3 γ干扰素的研究进展
1.3.1 干扰素的命名与分类
1.3.2 γ干扰素的分子结构与理化特征
1.3.3 γ干扰素的免疫调节
1.3.4 γ干扰素与MHC之间的联系
1.3.5 禽类γ干扰素的研究进展
1.4 山东省现有优良地方鸡品种资源
1.4.1 济宁百日鸡
1.4.2 汶上芦花鸡
1.4.3 寿光鸡
1.5 实时荧光定量PCP技术
1.5.1 实时荧光定量PCP技术的应用原理
1.5.2 实时荧光定量PCR技术在动物遗传育种上的应用
1.5.2.1 实时荧光定量PCR技术在细胞因子的表达分析
1.5.2.2 实时荧光定量PCR技术在单核苷酸多态性及突变的表达分析
1.5.2.3 实时荧光定量PCR技术在转基因的应用
1.6 本研究的目的与意义
2 材料与方法
2.1 试验动物与病毒
2.2 试剂与工具酶
2.3 仪器与设备
2.4 常用试剂的配制
2.4.1 配制琼脂糖凝胶的主要试剂
2.4.2 配制非变性聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳及银染的主要试剂
2.5 试验方法
2.5.1 血液基因组DNA的提取和质量检测
2.5.2 引物设计与合成
2.5.3 PCR扩增与检测
2.5.4 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及其银氨染色
2.5.5 荧光PCR检测技术
2.5.6 数据统计分析
2.5.7 等位基因型的划分
2.5.8 组织总RNA的提取与质量检测
2.5.9 RNA反转录成cDNA
2.5.10 IFN-γ基因、β-actin基因PCR扩增
2.5.11 荧光定量PCR
3 试验结果与分析
3.1 四种鸡群等位基因型判定
3.1.1 基因组DNA提取结果
3.1.2 MHC基因的PCR结果
3.1.3 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结果
3.1.4 测序结果
3.1.5 四种鸡群遗传多样性的微卫星标记分析
3.1.6 四种鸡群的等位基因型与抗性分析
3.2 寿光鸡不同基因型IFN-γ表达量的分析
3.2.1 Total RNA提取结果
3.2.2 目的基因、持家基因扩增片段
3.2.3 目的基因与持家基因的标准曲线、溶解曲线和动力学曲线
3.2.4 IFN-γ基因在寿光鸡肝脾肾组织中mRNA表达结果
4 讨论
4.1 四种鸡群体遗传多样性的微卫星标记分析
4.2 四种鸡群体的不同基因型的划分与抗病性的相关性
4.3 寿光鸡不同基因型的抗马立克氏病比较
5 结论
参考文献
致谢
攻读学位期间发表论文的情况
本文编号：3753353
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
1 前言
1.1 马立克氏病的研究进展
1.2 MHC的性质和功能
1.2.1 MHC的命名与遗传学特性
1.2.2 MHC基因表达产物的分子结构
1.2.2.1 MHCⅠ类分子结构
1.2.2.2 MHCⅡ类分子结构
1.2.3 国内外家禽MHC的研究进展
1.2.4 主要组织相容性复合体与免疫抑制性肿瘤的研究进展
1.2.4.1 鸡主要组织相容性复合体与抗马立克氏病的相关研究
1.2.4.2 鸡主要组织相容性复合体与抗禽白血病的相关研究
1.2.4.3 鸡主要组织相容性复合体与抗禽网状内皮增生症的相关研究
1.3 γ干扰素的研究进展
1.3.1 干扰素的命名与分类
1.3.2 γ干扰素的分子结构与理化特征
1.3.3 γ干扰素的免疫调节
1.3.4 γ干扰素与MHC之间的联系
1.3.5 禽类γ干扰素的研究进展
1.4 山东省现有优良地方鸡品种资源
1.4.1 济宁百日鸡
1.4.2 汶上芦花鸡
1.4.3 寿光鸡
1.5 实时荧光定量PCP技术
1.5.1 实时荧光定量PCP技术的应用原理
1.5.2 实时荧光定量PCR技术在动物遗传育种上的应用
1.5.2.1 实时荧光定量PCR技术在细胞因子的表达分析
1.5.2.2 实时荧光定量PCR技术在单核苷酸多态性及突变的表达分析
1.5.2.3 实时荧光定量PCR技术在转基因的应用
1.6 本研究的目的与意义
2 材料与方法
2.1 试验动物与病毒
2.2 试剂与工具酶
2.3 仪器与设备
2.4 常用试剂的配制
2.4.1 配制琼脂糖凝胶的主要试剂
2.4.2 配制非变性聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳及银染的主要试剂
2.5 试验方法
2.5.1 血液基因组DNA的提取和质量检测
2.5.2 引物设计与合成
2.5.3 PCR扩增与检测
2.5.4 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及其银氨染色
2.5.5 荧光PCR检测技术
2.5.6 数据统计分析
2.5.7 等位基因型的划分
2.5.8 组织总RNA的提取与质量检测
2.5.9 RNA反转录成cDNA
2.5.10 IFN-γ基因、β-actin基因PCR扩增
2.5.11 荧光定量PCR
3 试验结果与分析
3.1 四种鸡群等位基因型判定
3.1.1 基因组DNA提取结果
3.1.2 MHC基因的PCR结果
3.1.3 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结果
3.1.4 测序结果
3.1.5 四种鸡群遗传多样性的微卫星标记分析
3.1.6 四种鸡群的等位基因型与抗性分析
3.2 寿光鸡不同基因型IFN-γ表达量的分析
3.2.1 Total RNA提取结果
3.2.2 目的基因、持家基因扩增片段
3.2.3 目的基因与持家基因的标准曲线、溶解曲线和动力学曲线
3.2.4 IFN-γ基因在寿光鸡肝脾肾组织中mRNA表达结果
4 讨论
4.1 四种鸡群体遗传多样性的微卫星标记分析
4.2 四种鸡群体的不同基因型的划分与抗病性的相关性
4.3 寿光鸡不同基因型的抗马立克氏病比较
5 结论
参考文献
致谢
攻读学位期间发表论文的情况
本文编号：3753353
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3753353.html
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