感染不同毒力新城疫病毒后鸡免疫器官Toll样受体及炎症相关基因的表达差异

发布时间：2023-03-05 17:29

　　新城疫是一种严重危害养禽业的急性传染病。尽管疫苗的广泛使用令新城疫得到了一定的控制,但近年来伴随毒力的不断增强,导致疫苗免疫的失败,其仍然严重制约着养禽业的健康发展。因此,从分子水平解析鸡对病毒感染的应答机制,寻找机体抗病相关的关键基因,通过遗传选育提高鸡的抗病能力将是家禽发展的主要方向。Toll样受体(TLRs)是机体一类重要的模式识别受体,其通过细胞的多种蛋白诱导机体的抗病毒免疫反应,但鸡的TLRs是否参与了机体抵抗新城疫病毒入侵的免疫应答反应呢?本试验选用SPF(无特定病原)罗曼蛋鸡,随机分成3组：每组35只鸡,其中的两组在14日龄分别接种新城疫强毒株-F48E9和中等毒株-Mukteswar。在感染后的1、2、4天,每个组分别采集5只鸡,每只鸡采集脾脏,胸腺和法氏囊组织。通过定量PCR分析TLRs基因和炎症相关基因在鸡抵抗新城疫病毒过程中的表达变化,同时,我们比较了这些基因在鸡感染不同毒力病毒后的表达量的变化,探讨不同毒株的致病机理。主要试验结果如下：TLR3的表达量在3个组织中都有一定的增加,两攻毒组脾脏组织TLR3在2天时表达量最高,胸腺和法氏囊中TLR3表达量呈逐渐上升趋...

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【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
常用词语缩写
1 文献综述
    1.1 抗病育种的研究现状
    1.2 鸡免疫系统简介
    1.3 先天免疫系统简介
    1.4 Toll-like受体基因家族
        1.4.1 TLRs的结构
        1.4.2 TLRs的分布
        1.4.3 TLRs的分类
        1.4.4 TLRs通路主要的衔接蛋白
        1.4.5 TLRs介导的信号通路
    1.5 炎症相关基因简介
    1.6 Toll-like受体及炎症相关因子在鸡先天免疫中的作用
        1.6.1 鸡TLRs简介
        1.6.2 鸡TLRs的分布
        1.6.3 TLRs在鸡抗病毒反应中的作用
        1.6.4 炎症相关因子在鸡抗病毒反应中的作用
    1.7 鸡新城疫简介
        1.7.1 新城疫临床症状
        1.7.2 新城疫病毒
        1.7.3 新城疫病毒的遗传演变和在我国的流行现状
    1.8 本研究的目的和意义
2 材料和方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 试验材料
        2.1.2 孵化育雏
        2.1.3 攻毒采样
    2.2 主要试剂及耗材
    2.3 主要仪器设备
    2.4 技术路线
    2.5 试验方法
        2.5.1 试验SPF鸡的饲喂
        2.5.2 组织RNA Trizol提取法
        2.5.3 RNA反转录PCR
        2.5.4 荧光定量PCR的条件优化
        2.5.5 荧光定量PCR
    2.6 数据统计分析
3 结果与分析
    3.1 RNA提取效果检测
    3.2 目的基因片段扩增
    3.3 目的基因的熔解曲线
    3.4 两攻毒组脾脏中TLR基因的表达差异
    3.5 两攻毒组胸腺中TLR基因的表达差异
    3.6 两攻毒组法氏囊中TLR基因的表达差异
    3.7 两攻毒组各组织中中MyD88和TRIF的表达差异
    3.8 核因子-KB及其抑制蛋白在组织中的表达差异
    3.9 炎症相关基因在组织中的表达差异
4 讨论
    4.1 TLR3对不同毒力新城疫病毒的差异性免疫应答
    4.2 TLR7对不同毒力新城疫病毒的差异性免疫应答
    4.3 TLR15对不同毒力新城疫病毒的差异性免疫应答
    4.4 TLR21对不同毒力新城疫病毒的差异性免疫应答
    4.5 鸡感染不同毒力病毒后炎症基因的差异性应答反应
5 结论
参考文献
致谢
攻读学位期间发表学术成果情况



本文编号：3756626