LncRNA 00046716对猪前体脂肪细胞分化和成熟脂肪细胞中脂质沉积的影响

发布时间：2023-03-10 16:05

　　产肉量和肉质是猪肉生产中极其重要的经济性状。肉质方面,脂肪的含量与肉的嫩度、风味和多汁性相关,并影响猪的整体胴体质量,是生猪生产中影响经济效益的重要因素。前体脂肪细胞分化及成熟脂肪细胞内脂质积累程度显著影响脂肪含量。项目组前期研究成果表明,骨形态发生蛋白2(BMP2)可以显著促进猪前体脂肪细胞分化,而在此过程中,前体脂肪细胞中有大量lncRNAs的表达发生显著变化,但它们的具体作用和机制尚不明确。因此,本研究首先体外分离培养猪前体脂肪细胞,在细胞分化过程中添加50ng/ml的BMP2后,利用高通量测序技术筛选出受BMP2调控的差异表达lncRNA,并通过生物信息学预测及构建lncRNA-miRNA-mRNA互作网络。随后分别通过双荧光素酶报告系统、qRT-PCR、油红O染色等方法明确候选lncRNA/miRNA/mRNA的相互调控关系及其对前体脂肪细胞分化、脂质生成与沉积的影响,结果表明:在132个受BMP2调控而差异表达的lncRNA中,有61个表达上调,71个下调。LncRNA潜在的靶基因GO功能富集在组织发育、器官形态发生和细胞分化等功能。KEGG通路则富集于mTOR信号通路、赖...

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
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引言
第一篇 文献综述
    第1章 脂肪的生成及其影响因素
        1 脂肪的形成及其与肉品质的关系
        2 影响脂肪沉积的因素
            2.1 畜禽品种
            2.2 营养水平与管理
            2.3 前体脂肪细胞分化
    第2章 LncRNA及 miRNA在脂肪形成中的作用
        1 LncRNA的来源和潜在功能
        2 miRNA的来源和潜在功能
        3 ceRNA机制的产生和研究进展
        4 LncRNA在前体脂肪细胞分化和脂肪形成中的作用
第二篇 研究内容
    第1章 BMP2 诱导的猪前体脂肪细胞差异lncRNA表达谱的构建及分析
        1 材料与方法
            1.1 实验材料
            1.2 方法
        2 结果
            2.1 RNA质量检测
            2.2 整体测序数据质量评估
            2.3 LncRNA鉴定
            2.4 差异表达lncRNA分析与靶基因筛选
            2.5 靶基因的GO分析
            2.6 通路显著性富集分析
            2.7 LncRNA-miRNA-mRNA互作预测分析与筛选
            2.8 差异表达lncRNA q-PCR验证结果
        3 讨论
        4 小结
    第2章 LncRNA 00046716 对猪前体脂肪细胞分化的影响
        1 材料与方法
            1.1 实验材料
            1.2 实验方法
        2 结果
            2.1 LncRNA 00046716、FASN在猪前体脂肪细胞分化过程中表达趋势
            2.2 LncRNA 00046716 在猪前体脂肪细胞中的转染效率检测结果
            2.4 LncRNA00046716 对猪前体脂肪细胞分化关键基因的影响..
            2.5 LncRNA 00046716 对猪脂肪细胞甘油三酯积累的影响
            2.6 备选lncRNA-miRNA-mRNA互作网络生物信息学预测
            2.7 LncRNA 00046716 可能竞争性结合miRNA-149 影响FASN的表达
            2.8 miRNA-149对FASN蛋白表达的影响
            2.9 双荧光素酶实验验证lncRNA00046716-miRNA-149-FASN调控网络
        3 讨论
        4 小结
结论
参考文献
导师简介
作者简介及在学期间所取得的科研成果
致谢



本文编号：3758389