缺硒对鸡甲状腺和肾脏功能的影响
发布时间：2023-03-11 04:26
硒是动物体内必需的微量元素之一,它具有许多生物学功能,如抗癌作用、解毒作用、抗氧化作用、调控甲状腺的代谢作用、增强机体免疫作用和防止疾病等作用,这些功能都与机体正常生命活动密切相关,这使得硒的生物学功能机制受到世界范围内的广泛重视,与其发挥生物学功能的硒蛋白也成为近年来世界研究的热点。 缺硒病是一种常见的营养代谢病,缺硒病表现出肌肉组织、胰腺等的变性坏死和渗出性素质等病理变化。目前,缺硒能引起胰腺、消化道等组织学损伤的研究报道较多,但缺硒在鸡肾脏、甲状腺组织损伤的报道很少。 本试验复制鸡缺硒病模型,通过缺硒对鸡肾脏组织炎症基因HO-1和iNOS mRNA和蛋白表达、对鸡甲状腺组织中25种硒蛋白mRNA表达和甲状腺激素含量的变化水平以及对鸡肾脏和甲状腺组织抗氧化功能的检测来探讨缺硒对肾脏、甲状腺组织损伤的机制。研究结果表明： 1.在试验期内,试验组鸡出现腹泻、渗出性素质等症状,上述结果表明,缺硒可导致鸡组织结构发生损伤,病例模型复制成功。 2.利用原核表达载体表达HO-1和iNOS融合蛋白免疫兔子,成功制备兔抗鸡HO-1和iNOS多克隆抗体。 3.缺硒导致鸡肾脏组织中炎症基因HO-1和i...
【文章页数】：51 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 引言
1.1 硒在机体内的代谢
1.2 硒蛋白的种类与功能
1.2.1 抗氧化硒蛋白
1.2.2 脱碘酶家族硒蛋白
1.2.3 钙调节硒蛋白
1.3 硒对甲状腺功能的影响
1.4 硒对肾脏的影响
1.5 炎症基因的研究进展
1.6 目的与意义
2 材料与方法
2.1 试验的总体设计
2.2 样品的采集与处理
2.3 主要仪器和试剂
2.3.1 主要仪器
2.3.2 主要试剂
2.4 鸡HO-1和iNOS基因的克隆、原核表达、多克隆抗体的制备
2.4.1 鸡HO-1和iNOS基因序列的克隆与鉴定
2.4.2 鸡HO-1和iNOS基因在大肠杆菌中的表达、纯化和鉴定
2.4.3 抗鸡HO-1和iNOS多克隆抗体的制备
2.5 检测项目与方法
2.5.1 甲状腺激素检测
2.5.2 组织抗氧化功能检测
2.5.3 肾功能指标检测
2.5.4 肾脏HO-1和iNOS蛋白表达的检测
2.5.5 引物的设计与合成
2.5.6 实时PCR扩增
2.5.7 2-△△Ct法分析基因表达的相对差异
2.6 试验数据的分析与统计
3 结果与分析
3.1 鸡HO-1和iNOS多克隆抗体制备
3.1.1 组织中总RNA的提取与鉴定
3.1.2 鸡HO-1和iNOS基因的PCR扩增结果
3.1.3 鸡HO-1和iNOS mRNA基因序列的测序结果
3.1.4 重组表达载体的构建与鉴定
3.1.5 融合蛋白的表达、鉴定与纯化
3.1.6 多克隆抗体的制备和鉴定结果
3.2 鸡抗氧化功能的检测结果
3.2.1 鸡肾脏组织抗氧化功能的检测结果
3.2.2 鸡甲状腺组织抗氧化功能的检测结果
3.3 鸡肾脏功能指标的检测结果
3.4 鸡肾脏HO-1和iNOS mRNA和蛋白表达的检测结果
3.4.1 实时PCR检测方法的建立
3.4.2 缺硒对鸡肾脏HO-1和iNOS mRNA表达影响的检测结果
3.5 缺硒对鸡肾脏HO-1和iNOS蛋白表达影响的检测结果
3.6 缺硒对鸡甲状腺功能影响的检测结果
3.6.1 血清中T3、T4、FT3、FT4和TSH检测结果
3.6.2 缺硒对鸡甲状腺25种硒蛋白mRNA的检测结果
4 讨论
4.1 鸡HO-1和iNOS的克隆、表达及多克隆抗体的制备
4.2 缺硒对鸡肾脏的影响
4.2.1 缺硒对鸡肾脏HO-1表达的影响
4.2.2 缺硒对鸡肾脏iNOS表达的影响
4.2.3 缺硒对鸡肾脏抗氧化功能的影响
4.2.4 缺硒对肾功能指标检测的影响
4.3 缺硒对鸡甲状腺组织内25种硒蛋白表达的影响
4.4 缺硒对鸡甲状腺激素的影响
5 结论
致谢
参考文献
附录
攻读硕士学位期间发表的学术论文
本文编号：3759194
【文章页数】：51 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 引言
1.1 硒在机体内的代谢
1.2 硒蛋白的种类与功能
1.2.1 抗氧化硒蛋白
1.2.2 脱碘酶家族硒蛋白
1.2.3 钙调节硒蛋白
1.3 硒对甲状腺功能的影响
1.4 硒对肾脏的影响
1.5 炎症基因的研究进展
1.6 目的与意义
2 材料与方法
2.1 试验的总体设计
2.2 样品的采集与处理
2.3 主要仪器和试剂
2.3.1 主要仪器
2.3.2 主要试剂
2.4 鸡HO-1和iNOS基因的克隆、原核表达、多克隆抗体的制备
2.4.1 鸡HO-1和iNOS基因序列的克隆与鉴定
2.4.2 鸡HO-1和iNOS基因在大肠杆菌中的表达、纯化和鉴定
2.4.3 抗鸡HO-1和iNOS多克隆抗体的制备
2.5 检测项目与方法
2.5.1 甲状腺激素检测
2.5.2 组织抗氧化功能检测
2.5.3 肾功能指标检测
2.5.4 肾脏HO-1和iNOS蛋白表达的检测
2.5.5 引物的设计与合成
2.5.6 实时PCR扩增
2.5.7 2-△△Ct法分析基因表达的相对差异
2.6 试验数据的分析与统计
3 结果与分析
3.1 鸡HO-1和iNOS多克隆抗体制备
3.1.1 组织中总RNA的提取与鉴定
3.1.2 鸡HO-1和iNOS基因的PCR扩增结果
3.1.3 鸡HO-1和iNOS mRNA基因序列的测序结果
3.1.4 重组表达载体的构建与鉴定
3.1.5 融合蛋白的表达、鉴定与纯化
3.1.6 多克隆抗体的制备和鉴定结果
3.2 鸡抗氧化功能的检测结果
3.2.1 鸡肾脏组织抗氧化功能的检测结果
3.2.2 鸡甲状腺组织抗氧化功能的检测结果
3.3 鸡肾脏功能指标的检测结果
3.4 鸡肾脏HO-1和iNOS mRNA和蛋白表达的检测结果
3.4.1 实时PCR检测方法的建立
3.4.2 缺硒对鸡肾脏HO-1和iNOS mRNA表达影响的检测结果
3.5 缺硒对鸡肾脏HO-1和iNOS蛋白表达影响的检测结果
3.6 缺硒对鸡甲状腺功能影响的检测结果
3.6.1 血清中T3、T4、FT3、FT4和TSH检测结果
3.6.2 缺硒对鸡甲状腺25种硒蛋白mRNA的检测结果
4 讨论
4.1 鸡HO-1和iNOS的克隆、表达及多克隆抗体的制备
4.2 缺硒对鸡肾脏的影响
4.2.1 缺硒对鸡肾脏HO-1表达的影响
4.2.2 缺硒对鸡肾脏iNOS表达的影响
4.2.3 缺硒对鸡肾脏抗氧化功能的影响
4.2.4 缺硒对肾功能指标检测的影响
4.3 缺硒对鸡甲状腺组织内25种硒蛋白表达的影响
4.4 缺硒对鸡甲状腺激素的影响
5 结论
致谢
参考文献
附录
攻读硕士学位期间发表的学术论文
本文编号：3759194
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3759194.html
