蛋白激酶C对PRRSV感染的影响以及GP5重组乳酸克鲁维酵母免疫效果的初步研究

发布时间：2023-03-18 22:56

　　猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)感染引起的一种猪的高度传染性疾病。临床上以妊娠母猪的繁殖障碍以及各年龄段猪,尤其是仔猪的呼吸性障碍为主要特征,给全球的养猪业造成了巨大的经济损失。因此,预防及控制PRRSV的感染和传播是目前亟待解决的问题。研究宿主细胞的信号转导网络(包括蛋白激酶C)对PRRSV感染的影响以及新型有效疫苗的探索具有重要意义。本论文分别对这两项内容进行研究。 蛋白激酶C (PKC)是细胞内多种信号转导通路的重要成分,参与调控细胞的增殖、迁移、分化和凋亡等多种重要的细胞功能。近年来,大量的研究表明许多病毒能够改变细胞蛋白激酶C的活性,利用PKC信号通路调控病毒的复制。但是,PKC信号通路对PRRSV复制的影响目前并不清楚。论文第一部分发现特异性抑制剂GF109203X抑制PKC信号通路后,细胞内病毒RNA的合成减少以及病毒蛋白的表达下降,降低...

【文章页数】：104 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
目录
缩略词表
第一章 引言
    1.1 猪繁殖与呼吸综合征
        1.1.1 PRRS的危害及流行病学特点
        1.1.2 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)
    1.2 PRRSV疫苗研究现状
        1.2.1 灭活疫苗
        1.2.2 弱毒疫苗
        1.2.3 亚单位疫苗
        1.2.4 核酸疫苗
        1.2.5 载体疫苗
    1.3 蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)信号通路
        1.3.1 PKC的结构
        1.3.2 PKC的激活
        1.3.3 PKC信号通路的功能
        1.3.4 PKC信号通路与病毒感染
    1.4 研究目的与意义
第二章 实验材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 主要实验仪器
        2.1.2 实验菌株及载体
        2.1.3 实验细胞及病毒
        2.1.4 实验动物
        2.1.5 主要实验试剂
    2.2 实验方法
        2.2.1 重组乳酸克鲁维酵母疫苗实验方法
        2.2.2 蛋白激酶C对PRRSV感染影响实验方法
第三章 蛋白激酶C对PRRSV感染影响的初步研究
    3.1 结果与分析
        3.1.1 GF109203X抑制PRRSV的产生
        3.1.2 不同浓度GF109203X对PRRSV复制的影响
        3.1.3 GF109203X抑制病毒RNA的合成和病毒粒子的产生
        3.1.4 GF109203X抑制病毒蛋白的表达
        3.1.5 GF109203X主要在病毒感染的早期阶段抑制PRRSV的复制
        3.1.6 GF109203X影响PRRSV的进入但不影响吸附
        3.1.7 PRRSV的复制依赖于PKCδ
        3.1.8 GF109203X影响PAMs中细胞因子的表达
    3.2 讨论
    3.3 小结
第四章 GP5重组乳酸克鲁维酵母疫苗免疫效果的初步研究
    4.1 结果与分析
        4.1.1 多克隆抗体的制备
        4.1.2 重组乳酸克鲁维酵母Yeast-GP5的构建
        4.1.3 Western blot检测重组酵母Yeast-GP5的表达
        4.1.4 Yeast-GP5免疫对PRRSV特异性IgG和sIgA的影响
        4.1.5 Yeast-GP5诱导PRRSV特异性T淋巴细胞增殖
        4.1.6 Yeast-GP5对IL-4表达的影响
        4.1.7 Yeast-GP5能够增强PRRSV特异性IFN-γ的产生
    4.2 讨论
    4.3 小结
第五章 结论与展望
    5.1 结论
    5.2 展望
参考文献
致谢
个人简介



本文编号：3764034