辽宁省朝阳地区猪场布鲁氏菌感染的调查研究
发布时间:2023-03-18 23:07
布鲁氏菌病是一种严重威胁人类健康的细菌性人兽共患病。布鲁氏菌主要有流产布鲁氏菌(B.abortus,牛布鲁氏菌)、马耳他布鲁氏菌(B.melitensis,羊布鲁氏菌)、猪布鲁氏菌(B.suis)和绵羊附睾布鲁氏菌(B.ovis)。布鲁氏菌能够感染各种驯养和野生动物,并对生殖系统的器官具有强烈的亲和力,可导致母畜流产和病畜生育能力减退,使畜主遭受严重的经济损失。为了更进一步的了解辽宁地区动物布鲁氏菌感染的流行情况,本研究针对2016年-2018年辽宁省朝阳地区规模化养猪场采集的猪血清样本和猪全血样本,分别进行动物布鲁氏菌的虎红平板凝集试验(RBT)、微量试管凝集试验(SAT)和竞争酶联免疫吸附试验(C-ELISA)的血清学调查,以及动物布鲁氏菌Bruce-Ladder多重PCR检测和多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA-15)的分子生物学调查,针对动物布鲁氏菌的感染率和流行菌株进行检测鉴定分析。结果表明,2016年-2018年辽宁省朝阳地区规模化养猪场动物布鲁氏菌的感染率是26.24%;辽宁省朝阳地区规模化养猪场主要流行菌株为猪布鲁氏菌(B.suis)。本研究为辽宁地区预防和控制布...
【文章页数】:73 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
abstract
第一章 前言
1.1 布鲁氏菌病
1.2 诊断技术
1.2.1 临床诊断
1.2.2 血清学诊断
1.2.3 病原学诊断
1.3 主要功能基因
1.3.1 LPS相关基因
1.3.2 外膜蛋白(Omp)基因
1.3.3 分泌蛋白(VirB)基因
1.3.4 调控蛋白(BvrR/BvrS)基因与热休克蛋白基因
1.4 布鲁氏菌参考菌株的宿主和地理区域分布
1.5 B.microti和 B.inopinata与其他菌种的关系
第二章 辽宁地区动物布鲁氏菌感染率的血清学调查
2.1 材料
2.1.1 血液样品
2.1.2 血清样品
2.1.3 布鲁氏菌标准血清
2.1.4 主要仪器
2.1.5 主要试剂
2.1.6 溶液配制
2.2 方法
2.2.1 虎红平板凝集试验(RBT)
2.2.2 微量试管凝集试验(SAT)
2.2.3 竞争酶联免疫吸附试验(C-ELISA)
2.3 结果
2.3.1 虎红凝集平板试验(RBT)
2.3.2 微量试管凝集试验(SAT)
2.3.3 竞争酶联免疫吸附试验(C-ELISA)
2.4 讨论
2.4.1 虎红平板凝集试验(RBT)
2.4.2 微量试管凝集试验(SAT)
2.4.3 竞争酶联免疫吸附试验(C-ELISA)
2.5 小结
2.5.1 虎红平板凝集试验结论
2.5.2 微量试管凝集试验结论
2.5.3 竞争酶联免疫吸附试验结论
第三章 辽宁地区动物布鲁氏菌流行菌株的分子生物学调查
3.1 材料
3.1.1 血液样品
3.1.2 布鲁氏菌野毒株
3.1.3 布鲁氏菌疫苗株
3.1.4 主要仪器
3.1.5 主要试剂
3.1.6 溶液配制
3.1.7 引物
3.2 方法
3.2.1 布鲁氏菌DNA的制备
3.2.2 布鲁氏菌Bruce-Ladder多重PCR检测
3.2.3 布鲁氏菌多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA-15)
3.3 结果
3.3.1 布鲁氏菌Bruce-Ladder多重PCR检测
3.3.2 多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA-15)
3.4 讨论
3.4.1 化学修饰的热启动Taq酶 PCR反应扩增体系
3.4.2 Bruce-Ladder
3.4.3 MLVA-15
3.5 小结
结论
参考文献
致谢
附录 中英文对照表
本人在攻读硕士学位期间所获得专利和奖励及参加学术会议情况
本文编号:3764050
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摘要
abstract
第一章 前言
1.1 布鲁氏菌病
1.2 诊断技术
1.2.1 临床诊断
1.2.2 血清学诊断
1.2.3 病原学诊断
1.3 主要功能基因
1.3.1 LPS相关基因
1.3.2 外膜蛋白(Omp)基因
1.3.3 分泌蛋白(VirB)基因
1.3.4 调控蛋白(BvrR/BvrS)基因与热休克蛋白基因
1.4 布鲁氏菌参考菌株的宿主和地理区域分布
1.5 B.microti和 B.inopinata与其他菌种的关系
第二章 辽宁地区动物布鲁氏菌感染率的血清学调查
2.1 材料
2.1.1 血液样品
2.1.2 血清样品
2.1.3 布鲁氏菌标准血清
2.1.4 主要仪器
2.1.5 主要试剂
2.1.6 溶液配制
2.2 方法
2.2.1 虎红平板凝集试验(RBT)
2.2.2 微量试管凝集试验(SAT)
2.2.3 竞争酶联免疫吸附试验(C-ELISA)
2.3 结果
2.3.1 虎红凝集平板试验(RBT)
2.3.2 微量试管凝集试验(SAT)
2.3.3 竞争酶联免疫吸附试验(C-ELISA)
2.4 讨论
2.4.1 虎红平板凝集试验(RBT)
2.4.2 微量试管凝集试验(SAT)
2.4.3 竞争酶联免疫吸附试验(C-ELISA)
2.5 小结
2.5.1 虎红平板凝集试验结论
2.5.2 微量试管凝集试验结论
2.5.3 竞争酶联免疫吸附试验结论
第三章 辽宁地区动物布鲁氏菌流行菌株的分子生物学调查
3.1 材料
3.1.1 血液样品
3.1.2 布鲁氏菌野毒株
3.1.3 布鲁氏菌疫苗株
3.1.4 主要仪器
3.1.5 主要试剂
3.1.6 溶液配制
3.1.7 引物
3.2 方法
3.2.1 布鲁氏菌DNA的制备
3.2.2 布鲁氏菌Bruce-Ladder多重PCR检测
3.2.3 布鲁氏菌多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA-15)
3.3 结果
3.3.1 布鲁氏菌Bruce-Ladder多重PCR检测
3.3.2 多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA-15)
3.4 讨论
3.4.1 化学修饰的热启动Taq酶 PCR反应扩增体系
3.4.2 Bruce-Ladder
3.4.3 MLVA-15
3.5 小结
结论
参考文献
致谢
附录 中英文对照表
本人在攻读硕士学位期间所获得专利和奖励及参加学术会议情况
本文编号:3764050
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