FAK信号通路调控Col-Ⅳ水解影响奶牛RFM发生机制的研究

发布时间：2023-03-24 23:21

　　国内外学者普遍认为奶牛胎衣不下(retained fetal membrane,RFM)的主要病理学基础是母体胎盘和胎儿胎盘之间的黏连,而造成黏连的主要物质是Ⅳ型胶原蛋白(Collagen-Ⅳ,Col-Ⅳ)。黏着斑激酶(Focal Adhesion Kinase,FAK)是一种125 kDa胞质内非受体型酪氨酸激酶,位于细胞间黏附处或细胞间基质黏附处,可调控MMP-2和MMP-9的活性,而MMP-2和MMP-9是Col-Ⅳ水解的关键酶,参与细胞之间的黏连过程。那么FAK在奶牛RFM过程中如何发挥作用,具体的作用机制如何尚不清楚。因此,本研究拟通过检测RFM奶牛母体胎盘组织中FAK信号通路各关键因子及COL-Ⅳ表达变化,明确FAK及Col-Ⅳ与奶牛RFM的关系,并在建立奶牛原代子宫内膜上皮细胞模型的基础上,以FAK信号通路和Col-Ⅳ为研究对象,运用分子生物学技术,通过过表达和基因沉默FAK,检测FAK信号通路相关因子和Col-Ⅳ的表达变化,阐明奶牛胎衣外排过程中FAK信号通路对Col-Ⅳ水解调控的分子机制,从而为丰富奶牛RFM病因学提供理论依据。选取胎次、体重、年龄和泌乳量都相近,且无...

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
1 文献综述
    1.1 引言
    1.2 RFM的研究进展
        1.2.1 RFM的流行病学特点
        1.2.2 奶牛的胎盘结构
        1.2.3 RFM的临床特征及并发症
        1.2.4 RFM病因学
        1.2.5 RFM的防治
    1.3 FAK的研究进展
        1.3.1 FAK在细胞存活和增殖中的信号传导
        1.3.2 FAK与细胞极性和迁移
        1.3.3 FAK与细胞黏附
    1.4 FAK与奶牛RFM
2 RFM奶牛母体胎盘中FAK信号通路关键信号分子变化及与疾病发生相关性的研究
    2.1 材料和方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 实验方法
    2.2 结果与分析
        2.2.1 免疫组织化学结果
        2.2.2 总RNA提取与浓度测定结果
        2.2.3 Q-PCR检测FAK信号通路关键分子和Col-Ⅳ的 mRNA表达变化结果
        2.2.4 总蛋白提取与浓度测定结果
        2.2.5 奶牛母体胎盘组织中FAK信号通路关键分子和Col-Ⅳ蛋白的表达水平
    2.3 讨论
    2.4 小结
3 FAK信号通路对Col-Ⅳ蛋白表达调控作用的研究
    3.1 实验材料和方法
        3.1.1 试验材料
        3.1.2 实验方法
    3.2 实验结果
        3.2.1 奶牛UCE原代细胞鉴定结果
        3.2.2 MTT法检测细胞活力以及确定FAK激活剂与抑制剂最佳浓度的结果
        3.2.3 FAK低表达和过表达影响通路关键因子及Col-Ⅳ表达的结果
    3.3 讨论
    3.4 小结
4 结论
参考文献
致谢
个人简历



本文编号：3770054