MSTN/Smad信号通路关键基因在大白猪和马身猪背最长肌中的发育性表达
发布时间：2023-03-29 19:05
肌肉生长发育受多种因子在时间和空间上的精密调控,MSTN/Smad信号通路在哺乳动物胚胎发育期以及出生后肌肉的生长发育过程中具有重要的调节作用。MSTN主要通过和其受体ActRIIB结合,激活Smad2、Smad3蛋白后,结合Smad4形成异源复合物,进入细胞核作用于靶基因MyoD,从而抑制肌肉的生长发育；FST是MSTN的拮抗剂,通过结合MSTN解除其抑制肌肉生长发育的功能。本试验以大白猪和马身猪为研究对象,采用qRT-PCR技术,检测了背最长肌组织中FST、MSTN、ActⅡB、Smad2、Smad3、 Smad4基因在mRNA水平的发育性表达,探讨相关基因在同一品种的相关性;并采用Western-blot技术检测了FST,Smad2基因在蛋白水平的发育性表达(所选的生长点为出生后1、30、60、90、120、150、180日龄)。具体结果如下：(1)两猪种中,FST、MSTN、ActRⅡB基因在mRNA水平呈现出不同的发育性表达趋势。FST、MSTN基因均在大白猪90日龄时表达量最高,而马身猪在150日龄时表达量最高；马身猪中ActRⅡB基因mRNA的表达量在90日龄时极显著高于...
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
第一章 文献综述
1 肌肉的生长发育
1.1 肌肉生长发育过程
1.2 肌纤维结构和类型
2 肌肉生长发育相关调控因子
2.1 Pax家族
2.1.1 Pax家族简介
2.1.2 Pax家族功能
2.2 生肌调节因子
2.2.1 MRFs家族简介
2.2.2 MRFs功能
2.3 肌细胞特异性增强因子2家族
2.3.1 MEF2家族简介
2.3.2 MEF2家族的功能
3 骨骼肌发育相关的信号通路
3.1 Wntβ-catenin信号通路
3.2 Notch信号通路
3.3 MAPK信号通路
3.4 TGF-β信号通路
3.4.1 肌肉生长抑制素
3.4.2 卵泡抑素
3.4.3 Smad蛋白家族
3.4.4 激活素IIB型受体
4 马身猪的研究概况
5 本研究的目的和意义
第二章 MSTN/Smad信号通路关键基因在猪背最长肌中mRNA发育性表达检测
1 材料和方法
1.1 试验材料
1.2 试验试剂和仪器
1.2.1 试验的主要仪器
1.2.2 试剂与耗材
1.3 试验方法
1.3.1 引物设计与合成
1.3.2 样品总RNA的提取
1.3.3 RNA浓度与纯度的检测
1.3.4 cDNA的合成
1.3.5 实时荧光定量PCR反应体系及反应条件的优化
1.3.6 标准曲线的制作
1.3.7 荧光定量PCR反应
1.4 数据处理与分析
2 结果与分析
2.1 总RNA的提取结果
2.2 标准曲线的制作与分析
2.3 qRT-PCR的扩增曲线和熔解曲线
2.4 马身猪和大白猪背最长肌FST基因的发育性表达
2.5 马身猪和大白猪背最长肌MSTN基因的发育性表达
2.6 马身猪和大白猪背最长肌ActRIIB基因的发育性表达
2.7 马身猪和大白猪背最长肌Smad2、Smad3和Smad4基因的发育性表达
2.8 背最长肌中FST与MSTN基因、MSTN与ActRIIB基因的相关性分析
2.9 背最长肌中Smad2和Smad3发育性表达变化的相关性
3 讨论
3.1 关于FST、MSTN、ActRIIB基因表达趋势变化的分析
3.2 Smad2、Smad3、Smad4基因在大白猪和马身猪背最长肌中的发育性表达研究
第三章 FST和Smad2蛋白在大白猪、马身猪背最长肌中的发育性表达
1 材料和方法
1.1 试验材料
1.2 主要仪器和试剂
1.2.1 主要仪器
1.2.2 主要试剂
1.2.3 所需溶液及配制过程
1.3 试验方法
1.3.1 蛋白的提取
1.3.2 蛋白质浓度的测定
1.3.3 Western-blot技术
1.4 数据分析
2 结果与分析
2.1 FST蛋白在大白猪和马身猪背最长肌中的发育性表达
2.2 Smad2蛋白在大白猪和马身猪背最长肌中的发育性表达
3 讨论
3.1 关于FST蛋白在背最长肌中的发育性表达分析
3.2 关于Smad2蛋白在背最长肌中的发育性表达分析
全文结论
参考文献
Abstract
致谢
本文编号：3774306
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
第一章 文献综述
1 肌肉的生长发育
1.1 肌肉生长发育过程
1.2 肌纤维结构和类型
2 肌肉生长发育相关调控因子
2.1 Pax家族
2.1.1 Pax家族简介
2.1.2 Pax家族功能
2.2 生肌调节因子
2.2.1 MRFs家族简介
2.2.2 MRFs功能
2.3 肌细胞特异性增强因子2家族
2.3.1 MEF2家族简介
2.3.2 MEF2家族的功能
3 骨骼肌发育相关的信号通路
3.1 Wntβ-catenin信号通路
3.2 Notch信号通路
3.3 MAPK信号通路
3.4 TGF-β信号通路
3.4.1 肌肉生长抑制素
3.4.2 卵泡抑素
3.4.3 Smad蛋白家族
3.4.4 激活素IIB型受体
4 马身猪的研究概况
5 本研究的目的和意义
第二章 MSTN/Smad信号通路关键基因在猪背最长肌中mRNA发育性表达检测
1 材料和方法
1.1 试验材料
1.2 试验试剂和仪器
1.2.1 试验的主要仪器
1.2.2 试剂与耗材
1.3 试验方法
1.3.1 引物设计与合成
1.3.2 样品总RNA的提取
1.3.3 RNA浓度与纯度的检测
1.3.4 cDNA的合成
1.3.5 实时荧光定量PCR反应体系及反应条件的优化
1.3.6 标准曲线的制作
1.3.7 荧光定量PCR反应
1.4 数据处理与分析
2 结果与分析
2.1 总RNA的提取结果
2.2 标准曲线的制作与分析
2.3 qRT-PCR的扩增曲线和熔解曲线
2.4 马身猪和大白猪背最长肌FST基因的发育性表达
2.5 马身猪和大白猪背最长肌MSTN基因的发育性表达
2.6 马身猪和大白猪背最长肌ActRIIB基因的发育性表达
2.7 马身猪和大白猪背最长肌Smad2、Smad3和Smad4基因的发育性表达
2.8 背最长肌中FST与MSTN基因、MSTN与ActRIIB基因的相关性分析
2.9 背最长肌中Smad2和Smad3发育性表达变化的相关性
3 讨论
3.1 关于FST、MSTN、ActRIIB基因表达趋势变化的分析
3.2 Smad2、Smad3、Smad4基因在大白猪和马身猪背最长肌中的发育性表达研究
第三章 FST和Smad2蛋白在大白猪、马身猪背最长肌中的发育性表达
1 材料和方法
1.1 试验材料
1.2 主要仪器和试剂
1.2.1 主要仪器
1.2.2 主要试剂
1.2.3 所需溶液及配制过程
1.3 试验方法
1.3.1 蛋白的提取
1.3.2 蛋白质浓度的测定
1.3.3 Western-blot技术
1.4 数据分析
2 结果与分析
2.1 FST蛋白在大白猪和马身猪背最长肌中的发育性表达
2.2 Smad2蛋白在大白猪和马身猪背最长肌中的发育性表达
3 讨论
3.1 关于FST蛋白在背最长肌中的发育性表达分析
3.2 关于Smad2蛋白在背最长肌中的发育性表达分析
全文结论
参考文献
Abstract
致谢
本文编号：3774306
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