奶牛原代乳腺上皮细胞的培养及β酪蛋白mRNA的表达

发布时间：2023-03-29 18:51

　　本试验旨在建立原代乳腺上皮细胞系的体外培养方法,并进行β酪蛋白mRNA的表达验证。取新鲜泌乳期的乳腺组织,采用组织块法培养纯化原代乳腺上皮细胞,利用显微镜观察细胞形态并进行细胞生长计数,采用实时荧光定量PCR技术检测β酪蛋白mRNA表达。结果显示,纯化培养的原代乳腺上皮细胞集聚成岛屿状生长,具有典型的铺路石和鹅卵石形状,细胞生长曲线呈"S"形,符合一般细胞的生长规律,并成功表达β酪蛋白mRNA。综上所述,本研究采用组织块法成功培养出具有正常生理功能的奶牛原代乳腺上皮细胞,为后续的乳腺上皮细胞功能研究提供了良好的细胞试验模型。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要试剂与仪器
    1.2 奶牛乳腺上皮细胞原代培养
    1.3 乳腺上皮细胞的纯化与传代
        1.3.1 乳腺上皮细胞纯化
        1.3.2 乳腺上皮细胞传代
    1.4 乳腺上皮细胞形态观察
    1.5 乳腺上皮细胞的生长计数
    1.6 乳腺上皮细胞的冻存与复苏
        1.6.1 细胞冻存
        1.6.2 细胞复苏
    1.7 乳腺上皮细胞β酪蛋白基因 (CSN2) 表达检测
2 结果
    2.1 乳腺上皮细胞原代培养
    2.2 乳腺上皮细胞形态观察
    2.3 乳腺上皮细胞生长曲线
    2.4 β酪蛋白基因 (CSN2) 表达结果
3 讨论
4 结论



本文编号：3774285