分枝杆菌噬菌体L5 LysA、LysB的表达及活性研究

发布时间：2023-04-03 19:53

　　分枝杆菌噬菌体是侵染分枝杆菌的病毒。在治疗分枝杆菌所致疾病方面具有一定的研究及开发价值，同时它也是研究分枝杆菌遗传学的工具。近些年，因抗生素的大量使用，细菌耐药性的产生和传播也越来越严重，人们对其关注也逐渐增多，而噬菌体裂解酶作为一种既不易产生耐药性，又具有独特作用的抗菌剂备受人们青睐。LysA和LysB为分枝杆菌噬菌体L5的两种细胞内溶素，具有裂解酶的特性，具备作为抗菌剂的潜力。本研究通过原核表达获得了纯化的LysA和LysB，并对其酶学性质进行了初步研究： 1、采用常规方法，扩增出分枝杆菌噬菌体L5的lysA基因（1431bp）和lysB基因（1029bp），成功构建克隆载体pMD19T-lysA和pMD19T-lysB。预测表明LysA、LysB均有信号肽，为分泌蛋白；LysA全长477aa，有2个α螺旋，7个β折叠，有溶解酶活性；LysB全长343aa，具有6个α螺旋，6个β折叠，有脂肪酶活性。 2、采用pET-28a表达载体用大肠杆菌成功表达出56.09kDa的LysA和41.32kDa的LysB，LysA、LysB均以包涵体形式存在。优化最适诱导条件为：37℃，1.0mmo...

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
目录
前言
第一章 文献综述
    1.1 分枝杆菌研究概况
    1.2 噬菌体裂解酶研究概况
    1.3 分枝杆菌噬菌体裂解酶研究进展
    1.4 研究的目的与意义
第二章 分枝杆菌噬菌体 L5 lysA、lysB 基因的克隆及序列分析
    2.1 试验材料
    2.2 试验方法
    2.3 结果
    2.4 讨论
    2.5 本章小结
第三章 分枝杆菌噬菌体 L5 LysA、LysB 的表达、纯化及活性研究
    3.1 试验材料
    3.2 试验方法
    3.3 结果
    3.4 讨论
    3.5 本章小结
结论
参考文献
作者简介
致谢



本文编号：3781047