PRRSV Nsp2、Nsp3、E与宿主细胞蛋白CD2AP、IFITM1、Tetherin的相互作用及其生物学意义

发布时间：2023-04-05 19:39

　　猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是严重危害我国生猪产业的重要病原。研究病毒编码蛋白与宿主细胞蛋白之间的相互作用对于理解PRRSV的致病机制具有十分重要的意义。本研究在筛选、鉴定与PRRSV蛋白相互作用的细胞蛋白的基础上,进一步分析了Nsp3与IFITM1、E蛋白与Tetherin、Nsp2与CD2AP之间相互作用的分子机制及其生物学意义,以期为阐明PRRSV的致病机制提供科学依据。 分别将含有PRRSV各个基因(除Nsp6和Nsp8)的酵母质粒pGBKT7转化酵母菌Y2H,进行细胞毒性和自激活实验,结果表明,PRRSV的各个基因编码的蛋白无细胞毒性和自激活现象。应用猪肺泡巨噬细胞(PAMs) cDNA文库和酵母双杂交技术,分别筛选与Nsp2、Nsp9、Nsp10、Nsp11和Nsp12相互作用的细胞蛋白,将阳性克隆进行了质粒提取和测序分析,并在NCBI上进行序列比对,确定了相应序列对应的基因和相互作用的候选蛋白。分别从PAMs中克隆固有抗病毒因子IFITM1、IFITM3、Tetherin、PKR、OAS、Mx1、ISG15和ISG56基因,并将克隆的片段构建到pGADT7载体上,...

【文章页数】：87 页

【学位级别】：博士

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Abstract
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附表清单
縮略词表
第一章 引言
    1.1 国内外研究现状
    1.2 研究的目的和意义
    1.3 研究的内容与技术路线
    1.4 研究目标
第二章 猪繁殖与呼吸综合征病毒蛋白与宿主细胞相互作用蛋白的筛选与鉴定
    摘要
    2.1 前言
    2.2 材料与方法
    2.3 结果与分析
    2.4 讨论
    2.5 小结
第三章 猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp3、E与IFITM1、Tetherin的相互作用
    摘要
    3.1 前言
    3.2 材料与方法
    3.3 结果与分析
    3.4 讨论
    3.5 小结
第四章 猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2与CD2AP的相互作用及其生物学意义
    摘要
    4.1 前言
    4.2 材料与方法
    4.3 结果与分析
    4.4 讨论
    4.5 小结
第五章 结论
第六章 创新点
第七章 文献综述
    7.1 细胞骨架的主要组分
    7.2 细胞骨架和病毒的生命周期
    7.3 细胞骨架对病毒的屏障作用
    7.4 结论与展望
参考文献
致谢
附录
作者简介



本文编号：3784006