禽腺病毒血清4型纳米PCR检测试剂盒的研制及应用

发布时间：2023-04-17 19:31

　　为研制一种高效、快捷、灵敏的禽腺病毒血清4型(FAdV-4)检测试剂盒,本研究根据FAdV-4的保守序列设计了一对引物及探针,并在下游引物标记FITC,探针标记Biotin,应用纳米PCR技术结合横向流动试纸条技术(LFD),优化反应及杂交条件后建立了检测FAdV-4的纳米PCR-LFD方法,并组装了FAdV-4纳米PCR检测试剂盒。同时对试剂盒进行了特异性、敏感性、批内批间可重复性、稳定性、保存期评估等试验及临床样品检测。特异性试验表明,此试剂盒能够特异性检测出FAdV-4,而对于禽的其他主要病毒性及细菌性病原如鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)、鸡传染性支气管炎病毒(IBV)、鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)、鸡马立克病病毒(MDV)、鸡减蛋综合征病毒(EDSV)、鸭瘟病毒(DPV)、新城疫病毒(NDV)、禽流感病毒H9亚型(AIV(H9))、禽呼肠孤病毒(ARV)、FAdV标准株(FAdV-1、FAdV-2、FAdV-8a、FAdV-8b和FAdV-11)、鸡大肠杆菌(E.coli)、金黄色葡萄球菌(SA)、鸡白痢沙门氏菌(SP)、鸡毒支原体(MG)的检测结果均为阴性。敏感性试验表...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要试剂及仪器
    1.2 样品及病毒株
    1.3 纳米PCR-LFD扩增条件和体系的优化
        1.3.1 引物
        1.3.2 纳米PCR反应及杂交反应
    1.4 FAdV-4纳米PCR试剂盒的组装
    1.5 FAdV-4纳米PCR试剂盒特异性试验
    1.6 FAdV-4纳米PCR试剂盒敏感性试验
    1.7 FAdV-4纳米PCR试剂盒批内与批间重复试验
    1.8 FAdV-4纳米PCR试剂盒稳定性试验
    1.9 FAdV-4纳米PCR试剂盒保存条件试验
    1.10 临床样品的检测
2 结 果
    2.1 FAdV-4纳米PCR反应体系和条件优化结果
    2.2 FAdV-4纳米PCR试剂盒的组装
    2.3 FAdV-4纳米PCR试剂盒特异性试验结果
    2.4 FAdV-4纳米PCR试剂盒敏感性试验结果
    2.5 FAdV-4纳米PCR试剂盒批内、批间重复性试验结果
    2.6 FAdV-4纳米PCR试剂盒稳定性试验结果
    2.7 FAdV-4纳米PCR试剂盒保存条件试验结果
    2.8 临床样品检测结果
3 讨 论
4 结 论



本文编号：3792754