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MBD4和TDG基因在猪前体脂肪细胞分化中的作用与机制

发布时间:2023-04-20 01:28
  脂肪在猪胴体中的数量和分布决定着猪肉的品质和风味,脂肪细胞是由前体脂肪细胞分化而来的,这一过程呈动态变化,同时受激素和生长因子的调控,这些激素或生长因子的改变会影响前体脂肪细胞的分化。表观遗传在细胞分化中起重要作用,可在基因组DNA序列不发生变化的前提下,基因表达发生改变。在前体脂肪细胞分化过程中,表观基因组也会随细胞分化而发生变化。DNA甲基化和去甲基化是表观遗传的重要部分,这两个过程相互平衡,维持了甲基化谱式的稳定。主动去甲基化相关的基因MBD4和TDG具有碱基切除修复功能,是重要的转葡糖基酶,在细胞分化中起重要作用,MBD4和TDG基因在猪前体脂肪细胞分化中的作用以及对相关基因表达水平的影响还没有被验证,因此,本文以猪前体脂肪细胞作为研究对象,分析MBD4或TDG基因对脂滴生成的影响以及与细胞分化相关的转录因子C/EBPα、PPARγ、aP2基因mRNA表达水平及基因启动子区甲基化水平的变化,以获得MBD4和TDG基因在猪前体脂肪细胞分化过程中的作用。 采取1-7d军牧一号仔猪皮下脂肪组织进行体外分离、培养并诱导分化,实时荧光定量PCR结果表明,C/EBPα基因mRNA表达量在猪...

【文章页数】:111 页

【学位级别】:博士

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中文摘要
Abstract
英文缩写词表
前言
第一篇 文献综述
    第1章 前体脂肪细胞分化及转录调控研究进展
        1.1 前体脂肪细胞分化过程
        1.2 前体脂肪细胞分化的转录调控
            1.2.1 CEBP 基因家族对前体脂肪细胞分化的调控
            1.2.2 PPARγ基因对前体脂肪细胞分化的调控
            1.2.3 C/EBPs 和 PPARγ基因对前体脂肪细胞分化的共调控作用
            1.2.4 aP2 基因在脂肪细胞分化过程中的调控作用
            1.2.5 与前体脂肪细胞分化相关的其它转录因子
        1.3 前体脂肪细胞分化的表观遗传学调控
            1.3.1 哺乳动物生长发育的表观遗传现象
            1.3.2 DNA 甲基化
            1.3.3 DNA 去甲基化
            1.3.4 前体脂肪细胞分化和脂肪生成的表观遗传学调控
            1.3.5 前体脂肪细胞分化中转录因子启动子区甲基化与基因表达的关系
    第2章 MBD4 和 TDG 基因研究进展
        2.1 MBD4基因研究进展
            2.1.1 MBDs 家族
            2.1.2 MBD4 基因简介
            2.1.3 MBD4 的作用底物
            2.1.4 MBD4 基因多态性
            2.1.5 MBD4 基因的调控
        2.2 TDG基因研究进展
            2.2.1 TDG 基因的结构和定位
            2.2.2 TDG 基因的酶活性
            2.2.3 TDG 基因的功能
第二篇 研究内容
    第1章 猪前体脂肪细胞分化相关基因表达规律分析
        1.1 材料与方法
            1.1.1 材料
            1.1.2 方法
        1.2 结果
            1.2.1 猪前体脂肪细胞分离、培养与诱导分化结果
            1.2.2 猪前体脂肪细胞总 RNA 提取与质量检测
            1.2.3 猪前体脂肪细胞分化过程中,相关基因 mRNA 表达量分析结果
        1.3 讨论
        1.4 小结
    第2章 MBD4 基因在猪前体脂肪细胞分化中的作用
        2.1 材料与方法
            2.1.1 材料
            2.1.2 方法
        2.2 结果
            2.2.1 siRNA 转染序列筛选
            2.2.2 MBD4‐siRNA 转染效果检测
            2.2.3 敲减 MBD4 基因对猪前体脂肪细胞分化的影响
            2.2.4 敲减 MBD4 基因分析 C/EBPα、PPARγ、aP2 基因启动子区甲基化水平
        2.3 讨论
        2.4 小结
    第3章 TDG 基因在猪前体脂肪细胞分化中的作用
        3.1 材料与方法
            3.1.1 材料
            3.1.2 方法
        3.2 结果
            3.2.1 siRNA 转染试剂筛选
            3.2.2 TDG‐siRNA 转染效率检测
            3.2.3 敲减 TDG 基因对猪前体脂肪细胞分化的影响
            3.2.4 敲减 TDG 基因,C/EBPα、PPARγ、aP2 基因启动子区甲基化水平的变化
        3.3 讨论
        3.4 小结
结论
参考文献
导师简介
作者简介
攻读博士期间发表的主要论文
致谢



本文编号:3794610

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