水牛PCNA和FSHR等基因在卵泡发育过程中表达模式的初步研究

发布时间：2023-05-05 19:13

　　水牛出生时卵巢中含有约数万个原始卵泡,但在水牛生命周期中只有约200个卵泡可以发育成熟并排卵,约99.9%的卵泡在生长过程中闭锁、退化。如何挖掘母水牛的繁殖潜能,开发并应用卵巢中的腔前卵泡,是水牛生殖生理研究的重要课题。本研究的目的是对水牛不同时期腔前卵泡中候选基因的表达进行检测,总结其表达特点及差异,为探明水牛卵泡发生的分子机制,优化水牛腔前卵泡体外培养系统奠定基础。现将相关研究结果总结如下。 1.水牛PCNA蛋白和VASA蛋白在卵巢组织中的表达定位研究。采用石蜡切片结合免疫组化的方法,对水牛PCNA蛋白和VASA蛋白在卵巢组织不同时期卵泡中的表达情况进行定位研究。结果发现,(1)原始卵泡中,PCNA和VASA蛋白在颗粒细胞并未检测到表达,卵母细胞中有表达；(2)初级卵泡中,PCNA和VASA在卵母细胞和部分颗粒细胞中均可检测到较低表达；(3)次级卵泡中,PCNA和VASA在卵母细胞和大多数的颗粒细胞中均可检测到表达,但VASA在卵母细胞核中未表达；(4)在有腔卵泡中,PCNA在颗粒细胞、卵泡膜细胞及卵母细胞周围的卵丘细胞中均有很强的表达,而VASA在这些细胞中均未检测到表达；随着卵...

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一部分 文献综述
    1 哺乳动物卵泡的发育过程
        1.1 卵泡的划分及其特点
        1.2 原始卵泡库的建立
        1.3 原始卵泡的生长发育及调控
    2 动物腔前卵泡体外发育的研究
    3 腔前卵泡的分离方法概述
        3.1 酶消化法
        3.2 机械分离法
        3.3 酶-机械分离结合法
        3.4 显微分离法
    4 腔前卵泡的体外培养方法概述
        4.1 普通培养法
        4.2 二维培养法
        4.3 三维培养法
        4.4 共培养法
        4.5 培养板倒置法
    5 生长因子和激素等在腔前卵泡发育中的作用
        5.1 增殖细胞核抗原(PCNA)
        5.2 VASA
        5.3 卵泡刺激素(FSH)
        5.4 胰岛素样生长因子(IGFs)
        5.5 成纤维样细胞生长因子2(FGF-2)
    6 本研究的意义和目的
第二部分 试验研究
    第一章 水牛PCNA和VASA蛋白在卵巢中的表达定位研究
        摘要
        1 试验材料与方法
            1.1 主要试验试剂
            1.2 主要仪器
            1.3 卵巢来源
            1.4 试验方法
        2 结果
            2.1 水牛PCNA蛋白在卵巢中的表达定位
            2.2 水牛VASA蛋白在卵巢中的表达定位
        3 分析与讨论
            3.1 水牛PCNA蛋白在卵巢中的表达定位
            3.2 水牛VASA蛋白在卵巢中的表达定位
        4 结论
    第二章 水牛PCNA、FSHR、IGF及FGF等基因在不同时期腔前卵泡中的表达研究
        摘要
        1 试验材料与方法
            1.1 主要试验试剂
            1.2 主要仪器
            1.3 卵巢来源
            1.4 试验方法
            1.5 试验设计
            1.6 数据分析
        2 结果
            2.1 不同时期腔前卵泡的观察
            2.2 水牛不同时期腔前卵泡中PCNA mRNA的表达
            2.3 水牛不同时期腔前卵泡中FSHR mRNA的表达
            2.4 水牛不同时期腔前卵泡中IGFR-1、IGF-Ⅱ及其受体IGFR-2的表达
            2.5 水牛不同时期腔前卵泡中FGF-2及其受体FGFR-2的表达
        3 分析与讨论
            3.1 水牛不同腔前卵泡中FSHR mRNA的表达
            3.2 水牛不同腔前卵泡中IGFR-1、IGF-Ⅱ及其受体IGFR-2的表达
            3.3 水牛不同腔前卵泡中FGF-2及其受体FGFR-2的表达
        4 结论
参考文献
致谢
论文发表情况



本文编号：3808242