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LPS和沙门氏菌刺激时鸡脑内TLR4的表达规律研究

发布时间:2023-05-05 18:32
  由于血脑屏障(Blood Brain Barrier, BBB)的存在,中枢神经系统(Central Nervous System, CNS)被认为是免疫特免区,CNS内炎症感染与免疫反应一直以来都备受关注和争议。Toll样受体(Toll like receptors, TLRs)的发现促进了人们对脑内炎症反应机制的认识,吸引了众多研究者的目光。TLR4是第一个被发现的TLRs,广泛分布于机体的组织细胞。有研究表明TLR4在哺乳动物CNS内胶质细胞上表达,并证实在炎症过程中,胶质细胞通过TLR4与配体结合而发挥作用。目前有关TLR4与家禽脑内炎症和免疫反应的关系缺乏系统研究报道。因此,本项目拟以2日龄雏鸡作为试验对象,研究脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)和沙门氏菌刺激对脑组织结构和BBB超微结构的影响,同时检测鸡脑组织内TLR4的分布特征以及表达变化,为揭示脑内天然免疫反应机制奠定基础。主要研究内容和结果如下: 1.LPS和沙门氏菌刺激对脑组织结构的影响 本试验采用LPS和沙门氏菌腹腔注射2日龄雏鸡,探究细菌及其产物外周刺激后,脑组织结构的变化。结果显示:与对照...

【文章页数】:77 页

【学位级别】:硕士

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基金项目资助
摘要
Abstract
縮略语表
1 前言
    1.1 立题依据
    1.2 文献综述
        1.2.1 CNS免疫的研究现状
        1.2.2 TLRs的作用及其与天然免疫的关系
            1.2.2.1 TLRs的发现、基本结构和基因定位
            1.2.2.2 TLRs在生物体内的分布及其生物学功能
            1.2.2.3 TLR4的信号通路研究
            1.2.2.4 TLRs与CNS的关系
        1.2.3 鸡TLRs研究进展
        1.2.4 血脑屏障的研究进展
            1.2.4.1 血脑屏障的发现、结构和功能
            1.2.4.2 LPS对血脑屏障结构和功能的影响
    1.3 本研究的目的和意义
2 材料与方法
    2.1 试验动物与器材
        2.1.1 试验动物及处理
        2.1.2 主要仪器
        2.1.3 主要试剂
        2.1.4 主要溶液和试剂的配制
    2.2 试验方法
        2.2.1 样品采集
        2.2.2 石蜡切片制作
        2.2.3 苏木精-伊红(HE)染色
        2.2.4 两步法免疫组化染色
        2.2.5 电镜切片制作
        2.2.6 ELISA检测
        2.2.7 图像采集及数据分析
3 结果
    3.1 LPS和沙门氏菌外周刺激后不同时间点脑组织结构的变化
        3.1.1 LPS外周刺激后脑组织结构的变化
        3.1.2 沙门氏菌外周刺激后脑组织结构的变化
    3.2 沙门氏菌外周刺激致脑内BBB超微结构的变化
        3.2.1 沙门氏菌刺激对鸡大脑内BBB超微结构的影响
        3.2.2 沙门氏菌刺激对鸡小脑内BBB超微结构的影响
    3.3 TLR4在鸡脑组织的分布特征
        3.3.1 TLR4在鸡小脑内的分布特征
        3.3.2 TLR4在鸡大脑内的分布特征
    3.4 LPS和沙门氏菌刺激对脑内免疫因子表达的影响
        3.4.1 LPS和沙门氏菌刺激对脑内TLR4表达的影响
        3.4.2 LPS和沙门氏菌刺激对小胶质细胞活性的影响
        3.4.3 LPS和沙门氏菌刺激对内皮细胞活性的影响
        3.4.4 LPS和沙门氏菌刺激对脑内炎症因子表达的影响
4 讨论
    4.1 LPS和沙门氏菌外周刺激对脑组织结构的影响
    4.2 沙门氏菌外周刺激对血脑屏障超微结构的影响
    4.3 TLR4与鸡脑内的天然免疫
        4.3.1 TLR4在鸡脑内的分布
        4.3.2 TLR4与BBB之间的关系
    4.4 LPS和沙门氏菌外周刺激对脑内免疫相关因子表达的影响
        4.4.1 LPS和沙门氏菌外周刺激对TLR4表达的影响
        4.4.2 LPS和沙门氏菌外周刺激对小胶质细胞活性的影响
        4.4.3 LPS和沙门氏菌外周刺激对微血管内皮细胞活性的影响
        4.4.4 LPS和沙门氏菌外周刺激对脑内炎症因子表达的影响
结论
参考文献
致谢
附录1 个人简历
附录2 论文发表情况



本文编号:3808172

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