IRES元件决定口蹄疫病毒细胞嗜性及其分子机制研究
发布时间:2024-06-30 00:58
口蹄疫(Foot-and-Mouth Disease,FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus, FMDV)引起牛、羊、猪等偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病。FMDV属于微RNA病毒科、口蹄疫病毒属成员。微RNA病毒科病毒的基因组5’末端缺乏帽子结构,其蛋白合成起始依赖于5’非编码区内的翻译顺式作用元件一内部核糖体进入位点(Internal ribosome entry site, IRES),它能够招募翻译起始因子及核糖体从而起始翻译。最近的研究发现,不同病毒的IRES在不同细胞中的翻译起始效率不同,这表明IRES可能是决定病毒细胞嗜性的重要元件。 为确定IRES元件是否与口蹄疫病毒的细胞嗜性有关,我们在O型FMDV反向遗传操作平台基础上,利用与FMDV IRES亲缘关系最近的牛鼻病毒(BRV) IRES进行置换,构建并拯救了嵌合BRV IRES的重组FMDV。该嵌合病毒在鼠源细胞BHK-21上具有与亲本毒相同的复制能力,然而在猪源细胞IBRS-2和PK-15上的复制能力却比亲本病毒下降100倍。这一发现表明,IRES是决定FMDV细...
【文章页数】:42 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
本文编号:3998155
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图1.1口蹄疫病毒基因组结构(引自Masonetal.2003)
nonstructuralproteins图1.1口蹄疫病毒基因组结构(引自Masonetal.2003)Fig1.1SchematicdiagramoftheFMDVgenome(RetrievedfromMasonetal.2003)FMDV....
图2.1FMDV亚基因组复制子RepFMDV构建结构示意图
图2.1FMDV亚基因组复制子RepFMDV构建结构示意图Fig.2.1SchematicdiagramofconstructionofthesubgenomicrepliconofFMDV2.1.6转染
图2.2RepFMDV的醒切鉴定
U:DL10000;1:PYS;2:RepFMDV图2.2RepFMDV的醒切鉴定IdentificationoftheRepFMDVbyrestrictionenzymea制能力RepFMDV转染BHK-2]后24h提取的细胞总所示。以上游或下游引物....
图2.3RepFMDV转染BHK-21细胞中负链RNA的RT-PCR检测
M1 2loooobp7000bp4ooobplooobpU:DL10000;1:PYS;2:RepFMDV图2.2RepFMDV的醒切鉴定Fig.2.2IdentificationoftheRepFMDVbyrestrictionenzymeana....
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