携带bla CTXM 和1型整合子的IncFⅡ型质粒介导大肠埃希氏菌多重耐药性传播机制研究

发布时间：2024-06-30 00:24

　　大肠埃希氏菌(Escherichia coli,E.coli)是养殖环境中最常见的条件致病菌,可引起畜禽不同程度的感染。抗生素作为治疗用药和生长促进剂被广泛用于养殖业,使得细菌逐渐产生耐药性,甚至出现全耐药菌,更为严重的是这些细菌的耐药基因可以通过食物链,环境等途径在人与动物之间互相转播,造成严重的耐药基因污染,对养殖业和人类健康造成巨大的威胁。自超广谱β-内酰胺类抗生素大量使用以来,越来越多的细菌对其产生耐药性。超广谱β-内酰胺酶(ESBL)具有很强的酶活性,能水解头孢菌素,青霉素及单环β内酰胺抗生素氨曲南。能产ESBL的基因有很多,blaaCTXM其中最主要的基因型之一。本研究旨在探究畜禽养殖环境中大肠埃希菌的耐药状况及主要耐药基因,并对多药耐药菌的质粒进行精细基因结构分析。前期我们在畜禽养殖场中的粪便、尿液、土壤及周围水环境等样品中采集了大量菌株,分纯保种后进行16S菌种鉴定。最终得到大肠埃希氏菌206株,奇异变形杆菌48株,普罗威登斯菌32株。采用K-B法检测大肠埃希氏菌的耐药表型,结果表明养殖环境中的大肠埃希氏菌对四环素和头孢唑啉的耐药性较高,对替加环素和多粘菌素的耐药率最低...

【文章页数】：88 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第1章 前言
    1.1 养殖场环境中抗生素的使用
    1.2 多耐药菌的危害
    1.3 大肠埃希氏菌
    1.4 细菌耐药性研究进展
    1.5 产超广谱B-内酰胺酶耐药基因
    1.6 介导耐药基因转移的移动元件
    1.7 细菌耐药性检测方法
        1.7.1 传统培养法
        1.7.2 PCR检测
    1.8 测序和比较基因组学
    1.9 研究内容和意义
        1.9.1 研究内容
        1.9.2 研究意义
第2章 养殖环境中大肠埃希氏菌的多重耐药传递性研究
    2.1 材料
        2.1.1 菌株来源
        2.1.2 仪器与设备
        2.1.3 试剂与培养基
    2.2 方法
        2.2.1 大肠埃希氏菌的分离与鉴定
        2.2.2 K-B测定大肠埃希氏菌的耐药表型
        2.2.3 改良CARBA NP法检测细菌产酶活性
        2.2.4 耐药基因筛查
        2.2.5 细菌耐药性传递实验
    2.3 结果
        2.3.1 大肠埃希氏菌的分离与鉴定结果
        2.3.2 大肠埃希氏菌的耐药表型构成
        2.3.3 三重PCR方法可靠性评价结果
        2.3.4 耐药基因型筛查结果
        2.3.5 碳青霉烯活性测定
        2.3.6 接合转移实验结果
    2.4 讨论
第3章 多重耐药质粒的测序与基因组学分析
    3.1 材料
        3.1.1 菌株来源
        3.1.2 仪器与设备
        3.1.3 试剂与培养基
    3.2 方法
        3.2.1 基因组提取
        3.2.2 基因组测序
        3.2.3 质粒序列分析
    3.3 结果
        3.3.1 质粒P1709008-CTXM和P1710032-CTXM测序和精细注释
        3.3.2 纳入分析质粒概况
        3.3.3 质粒P1709008-CTXM和P1710032-CTXM的骨架区
        3.3.4 P1709008-CTXM多药耐药区MDR-1分析
        3.3.5 P1709008-CTXM多药耐药区MDR-2和P1710032-CTXM多药耐药MDR分析
    3.4 本章小结
第4章 总结与展望
    4.1 总结
    4.2 展望
参考文献
硕士期间发表论文
致谢



本文编号：3998113