“肿瘤消”方剂诱导肿瘤细胞凋亡的机理研究

发布时间：2023-05-07 01:18

　　肿瘤（Tumor）已成为当前人类健康的一大杀手，严重威胁着人们的生命与健康。肺癌是目前世界上最常见的恶性肿瘤，是导致癌症相关死亡的主要因素。于此同时，动物肿瘤病的发病率和病死率也呈上升趋势。马立克氏病（Marek’s disease，MD）等肿瘤病具有高致病性和传染性，给畜牧业生产造成了严重损失。中药治疗肿瘤具有许多优势，从天然植物中寻找抗肿瘤活性成分是抗肿瘤药物研发的热点。秦岭主峰太白山为我国三大“药山”之一，中草药资源丰富，其中有149种以“七”字命名的药用植物，即太白“七药”。本研究从太白“七药”中筛选出6味中草药组成抗肿瘤中药方剂“肿瘤消”。为了验证“肿瘤消”方剂的抗肿瘤活性和作用机理，以人肺腺癌A549细胞和马立克氏淋巴瘤MDCC-MSBl细胞为主要的体外肿瘤细胞模型，对“肿瘤消”方剂诱导肿瘤细胞凋亡的作用和机理进行了研究，目的在于为科学、合理地开发太白山中草药资源提供指导，为临床抗肿瘤药物筛选提供理论支持。 （1）“肿瘤消”方剂对多种肿瘤细胞具有抗肿瘤活性。采用MTT法对“肿瘤消”方剂的抗肿瘤活性进行了检测，结果表明“肿瘤消”方剂对马立克氏淋巴瘤MDCC-MSBl细胞、人肺...

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
文献综述
    第一章 中药抗肿瘤研究进展
        1.1 人和动物肿瘤病概述
        1.2 中药抗肿瘤作用研究进展
            1.2.1 中药抗肿瘤作用及其中医机制
            1.2.2 中药复方抗肿瘤作用研究
            1.2.3 太白“七药”抗肿瘤作用研究进展
        1.3 中药抗肿瘤机制研究进展
            1.3.1 抑制肿瘤细胞生长、分裂
            1.3.2 诱导肿瘤细胞凋亡
            1.3.3 阻滞肿瘤细胞增殖周期
            1.3.4 影响原癌基因和抑癌基因的表达
            1.3.5 抑制端粒酶活性
            1.3.6 影响细胞凋亡信号传导
            1.3.7 抑制肿瘤血管生成
        1.4 展望
试验研究
    第二章 “肿瘤消”方剂抗肿瘤活性及诱导肿瘤细胞凋亡检测
        2.1 材料
            2.1.1 细胞株
            2.1.2 中草药制剂
            2.1.3 试剂
            2.1.4 试剂配制
            2.1.5 仪器
        2.2 方法
            2.2.1 细胞复苏、培养和传代
            2.2.2 MTT 法检测“肿瘤消”方剂对肿瘤细胞存活率的影响
            2.2.3 细胞形态学观察
            2.2.4 Hoechst 染色检测细胞凋亡
            2.2.5 DNA 片段化分析
            2.2.6 线粒体膜电位势能(ΔΨm)变化检测
            2.2.7 流式细胞仪检测细胞凋亡
            2.2.8 统计学分析
        2.3 结果
            2.3.1 “肿瘤消”方剂对肿瘤细胞存活率的影响
            2.3.2 “肿瘤消”方剂对 A549 细胞形态的影响
            2.3.3 凋亡 A549 细胞核形态学变化
            2.3.4 “肿瘤消”方剂对 MDCC-MSB1 细胞核内 DNA 降解的影响
            2.3.5 “肿瘤消”方剂对 MDCC-MSB1 细胞线粒体膜电位势能的影响
            2.3.6 “肿瘤消”方剂对肿瘤细胞凋亡率的影响
        2.4 讨论
        2.5 小结
    第三章 “肿瘤消”方剂诱导 A549 细胞凋亡的信号通路研究
        3.1 材料
            3.1.1 细胞株
            3.1.2 中草药制剂
            3.1.3 试剂
            3.1.4 试剂配制
            3.1.5 仪器
        3.2 方法
            3.2.1 细胞培养
            3.2.2 试验设计
            3.2.3 试验分组
            3.2.4 细胞蛋白样品制备
            3.2.5 SDS-PAGE 蛋白凝胶电泳
            3.2.6 转膜（半干转）
            3.2.7 一抗、二抗孵育
            3.2.8 显影
        3.3 结果
            3.3.1 “肿瘤消”方剂对 p38 MAPK 信号通路的影响
            3.3.2 “肿瘤消”方剂对死亡受体的影响
            3.3.3 “肿瘤消”方剂对 caspase 8 的影响
            3.3.4 “肿瘤消”方剂对 p53、Bax 和 Bcl-2 的影响
            3.3.5 “肿瘤消”方剂对 cytochrome c 的影响
            3.3.6 “肿瘤消”方剂对 caspase 9 和 caspase 3 的影响
        3.4 讨论
            3.4.1 肿瘤细胞模型的选择
            3.4.2 “肿瘤消”诱导 A549 细胞凋亡涉及到 p38 MAPK 的持续活化
            3.4.3 “肿瘤消”方剂诱导 A549 细胞凋亡的死亡受体途径
            3.4.4 “肿瘤消”方剂诱导 A549 细胞凋亡的线粒体途径
            3.4.5 “肿瘤消”方剂诱导 A549 细胞凋亡的信号通路模式图
        3.5 小结
结论
参考文献
缩略词表
致谢
作者简介



本文编号：3809964