N-乙酰半胱氨酸对猪小肠上皮细胞生长与活力的影响及作用机制的研究

发布时间：2023-05-07 06:21

　　本文主要研究N-乙酰半胱氨酸（N-acetyl cysteine，NAC）对猪小肠上皮细胞（intestinal porcine epithelial cell-1，IPEC-1）生长与活力的影响及其作用机制。 1NAC对IPEC-1细胞生长与活力的影响。 （1）将IPEC-1细胞分为5个处理组：对照组，100μM NAC组，200μM NAC组、400μM NAC组和50μM胱氨酸（cystine，Cyss）组，研究不同水平的NAC对细胞生长与活力的影响，明确NAC在IPEC-1细胞培养液中的最佳添加水平。结果显示，50μM Cyss组和三个水平NAC组IPEC-1细胞数量与对照组相比显著增加（P<0.01），三天后达到最多,而培养液中添加100μM NAC细胞活力最高（P<0.01）。综合IPEC-1细胞生长与活力的情况，明确NAC在IPEC-1细胞培养液中的最佳添加水平为100μM。（2）细胞随机分为对照组、50μM Cyss组、100μM Cyss组、200μM Cyss组，100μM NAC组，50μM Cyss+100μM NAC组，100μM Cyss+100...

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
缩写词表
第一章 绪论
    1.1 研究目的与意义
    1.2 国内外研究进展
        1.2.1 NAC的研究进展
        1.2.2 谷胱甘肽的研究进展
        1.2.3 EGFR信号通路
    1.3 小结与展望
    1.4 研究目标和内容
第二章 试验研究
    试验一 NAC 对 IPEC-1 细胞生长与活力的影响
        1.1 材料与方法
            1.1.1 试验材料与仪器
            1.1.2 试验方法
        1.2 数据分析
        1.3 试验结果
            1.3.1 NAC对IPEC-1细胞生长的影响
            1.3.2 NAC 对 IPEC-1 细胞活力的影响
            1.3.3 NAC、Cyss 对 IPEC-1 细胞生长的影响
            1.3.4 NAC、Cyss 对 IPEC-1 细胞活力的影响
        1.4 讨论
            1.4.1 NAC 对 IPEC-1 细胞生长情况的影响
            1.4.2 NAC 对 IPEC-1 活力情况的影响
            1.4.3 NAC、Cyss 对 IPEC-1 细胞生长与活力的影响
        1.5 小结
    试验二 NAC 对 IPEC-1 细胞生长和生理相关基因和蛋白表达的影响
        2.1 材料与方法
            2.1.1 试验材料与仪器
            2.1.2 试验方法
        2.2 数据分析
        2.3 试验结果
            2.3.1 NAC 对 IPEC-1 细胞 EGFR、AR、TGFα、Ras、ERK、Akt mRNA相对表达量的影响
            2.3.2 NAC 对 IPEC-1 细胞 mTOR、4E-BP1、P70S6K mRNA 相对表达量的影响
            2.3.3 NAC 对 IPEC-1 细胞 TLR4、NF-κB、HSP70 mRNA 相对表达量的影响
            2.3.4 NAC 对 IPEC-1 细胞 Claudin-1、ZO-1、Occludin mRNA 相对表达量的影响
            2.3.5 NAC 对 IPEC-1 细胞 Na/K-ATPase、SGLT、AMPK、CFTR、IGFBP-3mRNA 相对表达量的影响
            2.3.6 NAC 对 IPEC-1 细胞 4E-BP1 蛋白表达的影响
        2.4 讨论
            2.4.1 NAC 对 IPEC-1 细胞 EGFR、AR、TGFα、Ras、ERK、Akt mRNA相对表达量的影响
            2.4.2 NAC 对 IPEC-1 细胞 mTOR、4E-BP1、P70S6K mRNA 相对表达量的影响
            2.4.3 NAC 对 IPEC-1 细胞 TLR4、NF-κB、HSP70 mRNA 相对表达量的影响
            2.4.4 NAC 对 IPEC-1 细胞 Claudin-1、ZO-1、Occludin mRNA 相对表达量的影响
            2.4.5 NAC 对 IPEC-1 细胞 Na/K-ATPase、SGLT、AMPK、CFTR、IGFBP-3mRNA 相对表达量的影响
            2.4.6 NAC 对 IPEC-1 细胞 4E-BP1 蛋白表达的影响
        2.5 小结
    试验三 GSH 在 NAC 调控 IPEC-1 细胞生长中的作用
        3.1 材料与方法
            3.1.1 试验材料与仪器
            3.1.2 试验方法
            3.1.3 HPLC 检测 IPEC-1 细胞内还原型 GSH 和 Cys 的浓度
        3.2 数据处理
        3.3 试验结果
            3.3.1 不同浓度 BSO、DEM 对 IPEC-1 细胞生长的影响
            3.3.2 不同浓度 BSO、DEM 对 IPEC-1 细胞活力的影响
            3.3.3 添加 NAC 与 BSO、DEM 对 IPEC-1 细胞生长的影响
            3.3.4 添加 NAC 与 BSO、DEM 对 IPEC-1 细胞活力的影响
            3.3.5 NAC、Cys、Cyss、GSH、GSH-EE 对 IPEC-1 细胞生长的影响
            3.3.6 NAC、Cys、Cyss、GSH、GSH-EE 对 IPEC-1 细胞活力的影响
            3.3.7 HPLC 检测 IPEC-1 细胞内还原型 GSH 和 Cys 的浓度
        3.4 讨论
            3.4.1 BSO、DEM、NAC 对 IPEC-1 细胞生长、活力的影响
            3.4.2 NAC、Cys、Cyss、GSH、GSH-EE 对 IPEC-1 细胞生长与活力的影响
            3.4.3 HPLC 检测 IPEC-1 细胞内还原型 GSH 和 Cys 的浓度
        3.5 小结
    试验四 NAC 对 LPS 刺激 IPEC-1 细胞生长与活力的影响
        4.1 材料与方法
            4.1.1 试验材料与仪器
            4.1.2 试验方法
        4.2 数据分析
        4.3 试验结果
            4.3.1 NAC 对 LPS 刺激 IPEC-1 细胞生长的影响
            4.3.2 NAC 对 LPS 刺激 IPEC-1 细胞活力的影响
            4.3.3 NAC 对 LPS 刺激 IPEC-1 细胞 EGFR、AR、TGFα、Ras、ERK、Akt、mTOR、Bax、Cyclin D mRNA 表达量的影响
            4.3.4 NAC 对 LPS 刺激 IPEC-1 细胞、NF-κB、TLR4、IL-8、IL-6、TNF-α、STAT3、HSP70、pBD-1 mRNA 表达量的影响
            4.3.5 NAC 对 LPS 刺激 IPEC-1 细胞 Claudin-1、Na/K-ATPase、ZO-1、CFTR mRNA 表达量的影响
            4.3.6 NAC 对 LPS 刺激 IPEC-1 细胞 IGF-1、IGF-1R、IGFBP-3、AMPK、SGLT 1 mRNA 表达量的影响
        4.4 讨论
            4.4.1 NAC 对 LPS 刺激 IPEC-1 细胞生长、活力的影响
            4.4.2 NAC 对 LPS 刺激 IPEC-1 细胞 EGFR、AR、TGFα、Ras、ERK、Akt、mTOR、Bax、Cyclin D mRNA 表达量的影响
            4.4.3 NAC 对 LPS 刺激 IPEC-1 细胞 NF-κB、TLR4、IL-8、IL-6、TNF-α、STAT3、HSP70、pBD-1 mRNA 表达量的影响
            4.4.4 NAC 对 LPS 刺激 IPEC-1 细胞 Claudin-1、Na/K-ATPase、ZO-1、CFTR mRNA 表达量的影响
            4.4.5 NAC 对 LPS 刺激 IPEC-1 细胞 IGF-1、IGF-1R、IGFBP-3、AMPK、SGLT1 mRNA 表达量的影响
        4.5 小结
第三章 结论和建议
    3.1 主要结论
    3.2 创新点
    3.3 有待进一步研究的问题
参考文献
致谢
硕士研究生期间的研究成果



本文编号：3810453