NONHSAT184603.1基因对解旋酶基因BLM表达的影响

发布时间：2023-05-13 19:24

　　解旋酶BLM (bloom helicase)在细胞的增殖生长过程中有着重要的调控作用,YAP (yes associated protein)和TAZ (transcriptional coactivator with PDZ-binding motif)蛋白作为哺乳动物Hippo信号通路下游的转录共激活因子和关键成分,参与调控细胞的增殖、凋亡以及迁移等多种生理过程,而长链非编码RNA (long non-coding RNA, LncRNA)在细胞的生长增殖过程中具有重要的调控作用。为探究LncRNA对BLM、YAP、TAZ表达的影响,本研究通过mirBase (http://www.mirbase.org/)、NONCODE (http://www.noncode.org/)及自主开发程序SWChen 2.3筛选与BLM解旋酶相关的LncRNAs,利用荧光定量PCR技术检测筛选的LncRNA在22RV-1、PC3、LNCap、WPMY-1四种细胞系中的表达情况,构建LncRNA超表达载体,检测转染后24及48 h LncRNA对BLM、YAP及TAZ的影响。本研究以筛选出的NON...

【文章页数】：10 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验细胞与主要试剂
    1.2 细胞的传代培养
    1.3 引物设计
    1.4 细胞总RNA的提取和cDNA的合成
    1.5 N183在WPMY-1、22RV-1、LNCap、PC3细胞中的表达谱分析
    1.6 N183超表达载体构建及序列分析
    1.7 qRT-PCR检测超表达pcDNA3.1(+)-N183对细胞BLM、YAP、TAZ转录水平的影响
    1.8 基因相对表达量的计算
2 结果与分析
    2.1 N183在各细胞系中的表达情况
    2.2 N183基因超表达载体的鉴定
    2.3 超表达N183对WPMY-1和PC3细胞中BLM、YAP、TAZ基因表达的影响
3 讨论
4 结论



本文编号：3816361