LHR、PRLR基因在不同发育阶段牦牛睾丸中的表达与定位

发布时间：2023-05-13 16:57

　　促黄体素受体(luteinizing hormone receptor, LHR)和催乳素受体(prolactin receptor, PRLR)基因在哺乳动物生殖发育中扮演着重要角色,广泛存在于各种组织。为分析不同年龄牦牛(Bos grunniens)睾丸组织中LHR、PRLR基因表达的变化模式,并探究其在成年期牦牛不同器官中的表达差异,分别采集幼年期(6月龄)、初情期(24月龄)、性成熟期(36月龄)、成年期(72月龄)牦牛睾丸组织和72月龄公牦牛的肾脏、肝脏、肺脏、心脏、脾脏、骨骼肌等器官组织。采用qRT-PCR技术检测不同发育时期牦牛睾丸组织和成年牦牛不同器官组织中LHR、PRLR mRNA表达水平,并采用免疫组织化学技术研究不同发育期牦牛睾丸组织的LHR、PRLR蛋白表达定位。结果显示,LHR、PRLR基因在牦牛睾丸组织中的表达量从幼年期到性成熟期极显著增加(P<0.01),成年期与性成熟期差异不显著。成年牦牛不同器官组织LHR基因在睾丸组织中的表达水平高于在肾脏、骨骼肌和肺脏组织中的表达水平(P<0.05),PRLR基因在肾脏的表达量最高,其次为骨骼肌、睾丸和脾...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要试剂与仪器
    1.2 牦牛组织样本采集
    1.3 总RNA的提取及cDNA的合成
    1.4 引物设计及合成
    1.5 常规逆转录PCR(reverse transcription poly-merase chain reaction,RT-PCR)检测
    1.6 实时荧光定量PCR(quantitative real-timePCR,q RT-PCR)
    1.7 免疫组织化学技术检测LHR和PRLR蛋白在牦牛睾丸组织中的分布与表达
2 结果与分析
    2.1 睾丸组织总RNA的提取
    2.2 LHR和PRLR基因的PCR扩增
    2.3 扩增产物特异性分析
    2.4 不同发育阶段牦牛睾丸组织的LHR、PRLR mRNA表达检测
    2.5 成年牦牛不同器官组织的LHR、PRLR mRNA表达检测
    2.6 不同发育阶段牦牛LHR和PRLR蛋白免疫组化检测
3 讨论
    3.1 不同发育阶段牦牛睾丸组织中LHR、PRLR mRNA的表达差异
    3.2 成年牦牛不同器官组织中LHR、PRLR mRNA表达差异
    3.3 不同发育期牦牛睾丸组织中LHR、PRLR的蛋白定位
4 结论



本文编号：3816200