益生菌对副猪嗜血杆菌感染致病的预防作用研究

发布时间：2023-05-17 21:12

　　副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)是猪上呼吸道常驻菌,通常在机体免疫能力低下时发病,该菌血清型众多,还有不同程度的耐药性,不同地区血清型和耐药谱差异较大。现阶段预防HPS多用灭活苗,但其适用地区较为局限,虽已出现多价联苗,但效果有限仍不能有效阻止该病的发生。近年来,有关益生菌的益生功能逐渐被开发,在临床上对疾病的预防效果显著,由此给了我们启示,在防治HPS病的过程中,是否可以借助于益生菌通过日常饲养的改良提高机体的免疫能力,从而抑制HPS病的发生。本研究就是寻找可抑制HPS生长繁殖并且提高机体免疫能力的益生菌,为HPS病的临床防治及生猪养殖业的快速发展提供科学依据,具有重要的现实意义及应用价值。实验一:首先从可能含有益生菌的食品、饲料及环境中分离益生菌,分离纯化之后对菌液采取4种不同处理方式,再利用琼脂扩散抑菌实验、纸片法抑菌实验以及生长抑制试验筛选能够有效抑制HPS生长的益生菌菌株,并进行鉴定。结果显示:1.利用MRS、TSB、TSA等培养基分离出多株益生菌,筛选出3株能够有效抑制HPS生长的益生菌菌株。2.通过对有效菌株进行革兰氏染色、PCR鉴定及测序...

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 HPS概述
        1.1.1 HPS血清型及流行情况
        1.1.2 HPS毒力因子研究进展
        1.1.3 HPS与信号通路
        1.1.4 HPS的侵染机制
    1.2 益生菌概述
        1.2.1 益生菌免疫机制的研究现状
        1.2.2 常见益生菌的应用
    1.3 研究目的与意义
第二章 有效抑制5型HPS生长益生菌的筛选及鉴定
    2.1 试验材料
        2.1.1 菌株来源
        2.1.2 主要试验仪器及设备
        2.1.3 试验药品与试剂
        2.1.4 主要试剂、培养基及实验用品的制备
    2.2 试验方法
        2.2.1 5型HPS实验室冻存菌株的复苏及菌种与血清型的鉴定
        2.2.2 益生菌的分离纯化
        2.2.3 抑菌试验分组及处理
        2.2.4 琼脂扩散试验
        2.2.5 纸片扩散试验
        2.2.6 生长抑制试验
        2.2.7 有效菌株的鉴定
        2.2.8 序列测定及分析
        2.2.9 菌浓度与OD600 关系的建立
    2.3 结果与分析
        2.3.1 实验室冻存5型HPS菌株的菌种与血清型鉴定结果
        2.3.2 益生菌的分离纯化及革兰氏染色结果
        2.3.3 琼脂扩散抑菌试验结果
        2.3.4 纸片扩散抑菌试验结果
        2.3.5 生长抑制试验结果
        2.3.6 有效菌株的鉴定结果
        2.3.7 测序结果及序列分析
        2.3.8 菌液浓度与OD600 的关系
    2.4 讨论
    2.5 小结
第三章 益生菌对5型HPS感染小鼠的预防作用研究
    3.1 试验材料
        3.1.1 菌株来源
        3.1.2 实验动物
        3.1.3 主要试验仪器与设备
        3.1.4 试验试剂与用品
        3.1.5 主要试剂和培养基的配制
    3.2 试验方法
        3.2.1 菌液的制备
        3.2.2 动物分组及处理
        3.2.3 小鼠体重及脏器解剖学检查
        3.2.4 小鼠组织病理学检查
        3.2.5 小鼠外周血淋巴细胞的提取
        3.2.6 流式细胞术检测小鼠外周血T淋巴细胞亚群
        3.2.7 小鼠外周血血清中IgA及 s IgA的检测
    3.3 结果与分析
        3.3.1 小鼠的临床表现及体重变化
        3.3.2 剖检病理变化
        3.3.3 小鼠组织病理学检查
        3.3.4 小鼠T淋巴细胞亚群的变化
        3.3.5 小鼠外周血中单核细胞及中性粒细胞的百分比
        3.3.6 小鼠外周血中IgA及sIgA的变化
    3.4 讨论
    3.5 小结
结论
参考文献
附录
致谢



本文编号：3818011