层粘连蛋白调控奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白合成途径研究

发布时间：2023-05-25 05:01

　　为探究在奶牛乳腺发育分化中细胞-ECM相互作用及相关整联蛋白β1信号机制,构建包被不同蛋白成分(BSA、LN、Matrigel)作为细胞培养底物的transwell培养模型,奶牛乳腺上皮细胞在分化培养液诱导下,检测整联蛋白β1及其下游信号分子ILK与Rac1表达变化。通过添加AIIB2抗体调控整联蛋白β1活性,分析下游信号分子ILK与Rac1表达变化。结果表明,LN可上调整联蛋白β1-ILK-Rac1途径提高β-酪蛋白合成分泌,AIIB2阻断可下调整联蛋白β1下游信号分子ILK表达,抑制β-酪蛋白合成分泌。研究发现,在分化培养液诱导下,LN可上调奶牛乳腺上皮细胞β-酪蛋白合成分泌,这种上调作用依赖整联蛋白β1-ILK通路活性。

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 细胞
        1.1.2 试验试剂
    1.2 方法
        1.2.1 原代奶牛乳腺上皮细胞CK18鉴定及MYH11阳性细胞检测
        1.2.2 不同基质上培养细胞
        1.2.3 细胞的AIIB2阻断培养
    1.3 荧光定量PCR
    1.4 蛋白免疫印迹
    1.5 统计分析
2 结果与分析
    2.1 奶牛乳腺上皮细胞生物学特性鉴定
    2.2 层粘连蛋白对奶牛乳腺上皮细胞泌乳分化的影响
        2.2.1 层粘连蛋白对奶牛乳腺上皮细胞中整联蛋白β1途径的影响
        2.2.2 层粘连蛋白对奶牛乳腺上皮细胞中β-酪蛋白表达的影响
    2.3 整联蛋白β1活性对奶牛乳腺上皮细胞中泌乳分化的影响
        2.3.1 整联蛋β1活性对奶牛乳腺上皮细胞中泌乳相关蛋白表达的影响
        2.3.2 整联蛋白β1活性对奶牛乳腺上皮细胞β-酪蛋白合成的影响
3 讨论
    3.1 层粘连蛋白对于奶牛乳腺上皮细胞泌乳的影响
    3.2 整联蛋白β1活性对于奶牛乳腺上皮细胞泌乳的影响
4 结论



本文编号：3822982