黄芪多糖对MDRV感染番鸭免疫调节及临床应用效果研究

发布时间：2023-05-26 23:45

　　番鸭呼肠孤病毒(MDRV)感染在临床上以肝脏和脾脏出现白色坏死点为特征,临床发病率和死亡率都很高,它能导致免疫抑制,给番鸭养殖业带来了巨大经济损失,然而目前对于番鸭呼肠孤病毒感染,缺乏有效的治疗药物。中药多糖具有抗病毒、增强免疫力等生物学功能,并且具有低毒性,低耐药等特点,对于番鸭呼肠孤病毒的防治表现出了巨大的潜力。本试验选用黄芪多糖(APS)分别进行了体外、体内抗病毒作用研究及免疫试验,初步揭示了黄芪多糖的抗病毒机理,结果表明黄芪多糖预防用药能延迟番鸭呼肠孤病毒感染番鸭出现症状的时间,减轻其引起的病理变化,显著降低死亡率,为临床应用提供了一定的理论依据。主要研究结果如下:试验一、黄芪多糖、猴头菇多糖、“芪苓散”超微粉用药浓度的筛选将1日龄雏番鸭165羽随机分成11组,每组15羽,分别为空白对照组,同居感染对照组,黄芪多糖低、中、高剂量预防组,猴头菇多糖低、中、高剂量预防组,“芪苍散”超微粉低、中、高剂量预防组。从1日龄开始,黄芪多糖和猴头菇多糖低、中、高剂量预防组分别以浓度O.1g/L、0.2g/L、0.4g/L饮水给药;“芪苓散”超微粉低、中、高剂量预防组分别以浓度2.5g/kg、...

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第一章 引言
    1 番鸭呼肠孤病毒概述
        1.1 病毒的分类地位
        1.2 病毒的形态及理化特性
        1.3 病毒的培养特性
        1.4 番鸭呼肠孤病毒感染的流行病学、临床症状及病理变化
        1.5 番鸭呼肠孤病毒对番鸭机体免疫功能的影响
        1.6 番鸭呼肠孤病毒感染的防治
    2 家禽免疫系统概述
        2.1 免疫器官概述
        2.2 免疫细胞概述
    3 部分细胞因子对免疫的调节研究
        3.1 白细胞介素1的免疫调节作用
        3.2 白细胞介素2的免疫调节作用
        3.3 白细胞介素4的免疫调节作用
        3.4 白细胞介素6的免疫调节作用
        3.5 肿瘤坏死因子-α的免疫调节作用
    4 禽类神经-内分泌-免疫系统调节
        4.1 糖皮质激素的免疫调节作用
        4.2 生长激素的免疫调节作用
        4.3 β-内啡肽的免疫调节作用
    5 抗病毒感染中细胞因子的免疫应答
    6 中药多糖对免疫的影响
        6.1 中药多糖对免疫器官的影响
        6.2 中药多糖对免疫细胞的影响
        6.3 中药多糖对细胞因子的作用
        6.4 中药多糖对免疫分子的作用
    7 中药多糖抗病毒作用
        7.1 中药多糖在体外条件下抗病毒作用的研究
        7.2 中药多糖在动物机体内的抗病毒研究
    8 本项目的立题依据、目的和意义
第二章 黄芪多糖、猴头菇多糖、“芪苓散”超微粉用药浓度筛选试验
    1 材料
        1.1 试验毒株
        1.2 实验番鸭
        1.3 主要仪器设备
        1.4 主要试剂
    2 番鸭呼肠孤病毒病自然感染发病模型
    3 用建立的MDRV自然感染发病模型确定中药饮水用药浓度
        3.1 实验番鸭分组
        3.2 番鸭临床症状、剖检病变观察
        3.3 中药的选择及浓度的确定
    4 结果与分析
        4.1 各组实验番鸭临床症状、死亡分布情况
        4.2 各组实验番鸭体重和死亡率分析
        4.3 试验各组剖检结果及分析
    5 讨论
        5.1 试验设计的依据
        5.2 黄芪多糖、猴头菇多糖、“芪苓散”超微粉的用药浓度筛选
第三章 黄芪多糖用药时间和疗程的确定
    1 材料
        1.1 试验毒株
        1.2 实验番鸭
        1.3 主要仪器设备
        1.4 主要试剂
    2 番鸭呼肠孤病毒病自然感染发病模型
    3 用建立的MDRV自然感染发病模型确定黄芪多糖饮水用药时间和用药疗程
        3.1 实验番鸭分组
        3.2 番鸭临床症状、剖检病变观察
        3.3 黄芪多糖用药时间和疗程的确定
    4 结果与分析
        4.1 各组实验番鸭临床症状、死亡分布情况
        4.2 各组实验番鸭体重和死亡率分析
        4.3 各组死亡实验番鸭剖检结果与分析
    5 讨论
        5.1 黄芪多糖对人工攻毒感染番鸭的治疗作用
        5.2 黄芪多糖的用药时间和疗程的确定
第四章 黄芪多糖对MDRV感染番鸭血清细胞因子、神经介质和激素的影响
    1 材料
        1.1 试验毒株
        1.2 实验番鸭
        1.3 主要仪器设备
        1.4 主要试剂
    2 番鸭呼肠孤病毒病自然感染发病模型
    3 黄芪多糖用药浓度、用药时间、疗程的确定重复试验
        3.1 实验番鸭分组
        3.2 血清标本采集
        3.3 剖检观察
        3.4 血清指标检测
        3.5 数据处理
    4 实验结果与分析
        4.1 各采样时间各组实验番鸭剖检变化
        4.2 各血清指标结果分析
    5 讨论
        5.1 黄芪多糖对MDRV同居感染番鸭剖检变化的影响
        5.2 黄芪多糖对健康番鸭(无MDRV感染的番鸭)血清部分细胞因子、神经介质和激素的影响
        5.3 雏番鸭感染MDRV后对番鸭血清部分细胞因子、神经介质和激素的影响
        5.4 黄芪多糖对MDRV感染的雏番鸭血清部分细胞因子、神经介质和激素的影响
第五章 黄芪多糖在体外对番鸭呼肠孤病毒的影响研究
    1 材料
        1.1 主要试剂
        1.2 主要实验仪器
    2 试验内容和方法
        2.1 黄芪多糖在体外CEF中最大安全浓度(无毒浓度)的测定
        2.2 MDRV-YB₄分离株细胞毒的扩繁及PCR鉴定
        2.3 先加入黄芪多糖对MDRV-YB₄分离株TCID₅₀的影响
        2.4 病毒与黄芪多糖同时加入到单层细胞中对MDRV-YB₄分离株TCID₅₀的影响
        2.5 先接种病毒后加黄芪多糖对MDRV-YB₄分离株TCID₅₀的影响
    3 结果与分析
        3.1 APS在CEF上的安全浓度测定
        3.2 MDRV-YB₄分离株细胞毒的PCR鉴定结果
        3.3 先加入黄芪多糖后接种病毒对MDRV-YB₄分离株TCID₅₀的影响
        3.4 病毒与黄芪多糖同时加入到单层细胞中对MDRV-YB₄分离株TCID₅₀的影响
        3.5 先接种病毒后加黄芪多糖对MDRV-YB₄分离株TCID₅₀的影响
    4 讨论
        4.1 黄芪多糖在鸡胚成纤维细胞上的安全浓度讨论
        4.2 黄芪多糖的3种加药方式对MDRV-YB₄分离株TCID₅₀的影响
第六章 黄芪多糖临床应用试验
    1 材料
        1.1 实验番鸭和场地
        1.2 主要仪器设备
        1.3 主要试剂
    2 试验方法与步骤
        2.1 实验番鸭分组
        2.2 临床观察与饲料消耗记录
        2.3 体重称取
        2.4 血清样品的采集
        2.5 血清指标检测
        2.6 数据处理
    3 结果与分析
        3.1 体重结果与分析
        3.2 成活率与料重比结果与分析
        3.3 各血清指标结果分析
    4 讨论
第七章 全文总结
    1 本研究结论
    2 本研究还需进一步解决的问题
参考文献
附录
    附录1 “芪苓散”超微粉配方
    附录2 鸡胚成纤维细胞制作方法
    附录3 细胞/组织RNA提取
    附录4 ELISA检测试剂盒说明书
    附录5 主要试剂的配制
    附录6 主要中英文缩略表
致谢



本文编号：3823494