我国新发NADC34-like PRRSV的流行病学调查及致病性研究

发布时间：2023-06-05 04:52

　　猪繁殖与呼吸障碍综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)由猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起,以母猪流产、死胎、木乃伊胎和仔猪呼吸道症状为主要特征,对我国及世界范围内的养猪业造成巨大的损失。中国大陆自1996年首次分离到PRRSV后,不断有新型PRRSV的报道,经过20多年的演化,PRRSV基因多样性变得十分复杂。2017年,我国首次报道NADC34-like PRRSV,该类毒株在美国是主要的PRRSV流行毒株,对美国养猪业造成了巨大的打击。推测我国该类毒株是从美国输入的。这将进一步增加我国PRRSV的复杂性,并对国内现有PRRSV的防控提出挑战。为了解我国NADC34-like PRRSV的流行情况和演化特点,本研究在2018～2019年从全国16个省、市和自治区的发病猪场采集疑似PRRSV阳性样品650份,共检测到6株NADC34-like PRRSV,其中HLJZD22-1812、HLJDZD32...

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【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 PRRSV病原学
        1.1.1 PRRSV分类
        1.1.2 PRRSV病毒粒子的形态结构
        1.1.3 PRRSV的理化特性
        1.1.4 PRRSV的基因组结构及编码的蛋白
        1.1.5 PRRSV基因组的转录和复制
    1.2 PRRSV的流行病学
        1.2.1 Ⅰ型PRRSV的流行病学
        1.2.2 Ⅱ型PRRSV的流行病学
        1.2.3 中国Ⅱ型PRRSV的流行病学及致病性
    1.3 PRRSV的重组
    1.4 研究的目的和意义
第二章 NADC34-like PRRSV的流行病学调查
    2.1 材料与方法
        2.1.1 材料样本
        2.1.2 主要试剂、仪器和菌株
    2.2 实验方法
        2.2.1 样品的处理
        2.2.2 引物的设计和合成
        2.2.3 病毒RNA的提取和cDNA的合成
        2.2.4 PCR扩增
        2.2.5 PCR产物回收
        2.2.6 目的片段的连接、转化、克隆
        2.2.7 序列分析
    2.3 结果
        2.3.1 2018²019年NADC34-like PRRSV的监测结果
        2.3.2 全基因组及各基因同源性分析
        2.3.3 遗传演化分析
        2.3.4 氨基酸推导序列分析
        2.3.5 重组分析
        2.3.6 我国NADC34-like PRRSV与 NADC30-like PRRSV的相似性分析
    2.4 讨论
    2.5 小结
第三章 NADC34-like PRRSV的分离及致病性研究
    3.1 材料与方法
        3.1.1 主要试剂和仪器
        3.1.2 细胞及实验动物
        3.1.3 病毒分离
        3.1.4 间接免疫荧光检测
        3.1.5 病毒滴度测定
        3.1.6 NADC34-like PRRSV HLJDZD32-1901 动物试验
        3.1.7 荧光定量PCR
        3.1.8 统计分析
    3.2 结果
        3.2.1 间接免疫荧光检测结果
        3.2.2 HLJDZD32-1901 攻毒实验体温、抗体水平及平均体重增长变化分析
        3.2.3 HLJDZD32-1901 攻毒实验病毒血症及各组织病毒载量分析
        3.2.4 HLJDZD32-1901 攻毒实验病理变化分析和免疫组化分析
        3.2.5 HLJDZD32-1901 株与IA/2014/NADC34 株关键区域氨基酸对比分析
    3.3 讨论
    3.4 小结
第四章 全文结论
参考文献
致谢
作者简历



本文编号：3831722