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粪肠球菌毒力基因ace敲除及其对细菌黏附与生物被膜形成的影响

发布时间:2023-06-10 15:46
  肠球菌是一类球形或卵圆形,呈对或短链存在,广泛存在于水、土壤等环境中,是人和动物体胃肠道正常菌群之一。肠球菌对人和动物致病主要通过黏附,侵袭以及组织损伤实现。通过黏附和肠黏膜的上皮细胞以及胞外基质结合起来,占位定植,进而侵入到机体内部,对宿主发挥生物屏障功能,最终引发组织损伤。而在肠球菌的众多毒力因子中,肠球菌胶原蛋白黏附素ace是肠球菌分泌于菌体表面的一种黏附素,在菌体生物膜形成过程中起重要作用,有良好的黏附活性。本研究通过对毒力因子Ace的研究,希望能对肠球菌的致病机理以及临床防治粪肠球菌的感染提供理论依据。根据GenBank中发表的肠球菌毒力因子Ace的基因序列,设计出一对ace基因的特异性引物,以粪肠球菌的DNA为模板,PCR扩增出1358bp的目的片段,经胶回收纯化后和载体pTG19-T相连接,转化入大肠杆菌DH5α中,经PCR扩增,酶切鉴定,证明成功构建出重组载体。对实验室保存的从河南省各大猪场分离的43株分离菌以及3株标准菌株进行ace基因PCR扩增,以检测菌株中ace基因的携带率及其保守性,结果显示,共有30株菌株扩出ace基因,携带率为71.7%,同时对这46株菌进行...

【文章页数】:63 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
致谢
中文摘要
常用缩略词
文献综述
    1. 肠球菌生物学特性
    2. 肠球菌毒力因子及研究进展
    3. 基因敲除技术及其应用
引言
试验一猪源粪肠球菌ace的基因克隆与序列比对
    1. 材料
    2. 方法
    3. 结果与分析
    4. 讨论
试验二猪源粪肠球菌ace基因缺失突变株的构建
    1. 材料
    2. 方法
    3. 结果与分析
    4. 讨论
试验三猪源粪肠球菌ace基因缺失株对细菌黏附与生物被膜形成的影响
    1. 材料
    2 方法
    3. 结果与分析
    4. 讨论
全文总结
参考文献
Abstract
发表论文



本文编号:3833142

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