日本血吸虫Sjp38MAPK基因编码cDNA的克

发布时间：2023-06-28 03:27

　　血吸虫需要雌雄虫配对和合抱以完成其发育成熟和产卵,并且成熟后血吸虫所产的产卵是造成宿主病理损伤的主要原因。因此,揭示参与血吸虫生殖发育相关的信号调控通路对开发新的防控策略具有重要意义。我们实验室前期通过磷酸化蛋白质组学研究发现Sjp38MAPK在日本血吸虫信号通路网络中是关键节点之一,为了阐明Sjp38MAPK在日本血吸虫的寄生和生殖发育过程中的作用,本研究对日本血吸虫Sjp38MAPK基因编码的cDNA进行了克隆,并对重组蛋白进行了表达及鉴定。另外,还对Sjp38MAPK在日本血吸虫不同发育阶段、雌雄虫的转录水平进行了分析。利用RNA干扰技术,抑制了Sjp38MAPK基因的转录,对Sjp38MAPK在日本血吸虫的生殖和发育中的功能进行了初步研究。具体包括以下三个内容:(一)日本血吸虫Sjp38MAPK基因编码cDNA的克隆表达及生物信息学分析根据实验室前期蛋白质组学鉴定的Sjp38MAPK,设计引物,进行PCR扩增,序列分析表明该基因序列包含一个1038bp的开放阅读框,编码Sjp38MAPK蛋白,预测分子量为39.58kD。生物信息学分析表明Sjp38MAPK序列与曼氏血吸虫的同源...

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
英文缩略表
第一章 引言
    1.1 血吸虫及血吸虫病概况
    1.2 MAPK信号通路的研究进展
        1.2.1 MAPK信号通路概述
        1.2.2 MAPK信号通路在血吸虫生殖细胞中的研究进展
        1.2.3 p38MAPK研究进展
    1.3 RNAi技术在血吸虫中的应用
第二章 日本血吸虫Sjp38MAPK克隆、重组蛋白表达及鉴定
    2.1 材料和方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 结果
        2.2.1 生物信息学分析Sjp38MAPK序列
        2.2.2 重组质粒的构建
        2.2.3 表达、纯化和鉴定重组蛋白Sjp38MAPK
    2.3 讨论
第三章 Sjp38MAPK在日本血吸虫中的表达分析
    3.1 材料和方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 结果
        3.2.1 日本血吸虫Sjp38MAPK在不同生长发育时期的表达
        3.2.2 日本血吸虫Sjp38MAPK在雌雄虫中的表达
    3.3 讨论
第四章 日本血吸虫Sjp38MAPK的体外干扰
    4.1 材料和方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 方法
    4.2 结果
        4.2.1 筛选日本血吸虫Sjp38MAPK的干扰siRNA
        4.2.2 siRNA-977 干扰日本血吸虫Sjp38MAPK对其卵壳蛋白的影响
        4.2.3 siRNA-977 干扰日本血吸虫对虫体活性的影响
    4.3 讨论
第五章 全文总结
参考文献
致谢
作者简介



本文编号：3835887