多肽类抗生素、吩噻嗪类和新型“瘦肉精”等兽药的免疫快速检测方法研究

发布时间：2023-08-05 19:41

　　近年来,随着畜牧业的高速发展,兽药在保证食源性动物增产、增效的同时,食品中兽药残留已经成为一个日益严重的全球性公共卫生问题。兽药的不当使用会使其残留在动物可食用组织、鸡蛋和奶制品中,不仅影响国际贸易、造成经济损失,更重要的是会给消费者的健康带来潜在风险。为了满足监测和控制食品兽药残留的需要,急需建立简单、廉价、灵敏、快速和高通量的分析方法。本研究主要针对多肽类抗生素杆菌肽锌(BAC)和多粘菌素(POL)、截短侧耳素类抗生素泰妙菌素(TIA)和沃尼妙林(VAL)、抗寄生虫药硝碘酚腈(NIT)、氯氰碘柳胺(CLT)和碘醚柳胺(RAF)、非甾体类抗炎药双氯芬酸(DIC)和卡洛芬(CAR)、抗组胺药赛庚啶(CPH)和吩噻嗪类(PZs)兽药,设计并合成人工抗原,制备高灵敏度的单克隆抗体,以此为研究基础建立相应的免疫学快速检测方法。(1)根据BAC的结构特征,设计并合成了人工抗原BAC-BSA,获得了两株抗BAC单克隆抗体6D2-G10和3F2-F11细胞株,抗体亚型均为IgG1型。6D2-G10具有更高的灵敏度,IC50值为0.59ng/mL,亲和力常数为6.69×109L/mol,对BAC结构...

【文章页数】：120 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
缩写表
第一章 绪论
    1.1 立题背景
    1.2 抗生素类兽药概述
        1.2.1 理化性质
        1.2.2 作用机理
        1.2.3 残留危害与限量标准
        1.2.4 检测方法
    1.3 抗寄生虫类兽药概述
        1.3.1 理化性质
        1.3.2 作用机理
        1.3.3 残留危害与限量标准
        1.3.4 检测方法
    1.4 非甾体类抗炎兽药概述
        1.4.1 理化性质
        1.4.2 作用机理
        1.4.3 残留危害和限量标准
        1.4.4 检测方法
    1.5 抗组胺药与吩噻嗪类药物概述
        1.5.1 理化性质
        1.5.2 作用机理
        1.5.3 残留危害与限量标准
        1.5.4 检测方法
    1.6 立题依据和主要研究内容
        1.6.1 本课题的意义及研究目的
        1.6.2 本课题的主要研究内容
第二章 多肽类抗生素单克隆抗体的制备及免疫学检测技术的建立
    2.1 引言
    2.2 仪器与化学试剂
        2.2.1 实验仪器
        2.2.2 实验材料
        2.2.3 溶液配制
        2.2.4 实验动物
    2.3 试验方法
        2.3.1 免疫原的设计与合成
        2.3.2 免疫原的表征
        2.3.3 动物免疫
        2.3.4 小鼠多抗血清检测
        2.3.5 单克隆抗体的制备
        2.3.6 单克隆抗体的鉴定
        2.3.7 BAC胶体金试纸条的建立与优化
        2.3.8 POL的ic-ELISA检测法的建立
    2.4 结果与讨论
        2.4.1 人工抗原的合成和鉴定
        2.4.2 小鼠多抗血清的鉴定
        2.4.3 单克隆细胞株筛选
        2.4.4 单克隆抗体性质鉴定
        2.4.5 BAC胶体金试纸条的建立与优化
        2.4.6 COL的ic-ELISA方法的建立
    2.5 本章小结
第三章 截短侧耳素类抗生素单克隆抗体的制备及免疫学检测技术的建立
    3.1 引言
    3.2 仪器与化学试剂
        3.2.1 实验仪器
        3.2.2 实验材料
        3.2.3 溶液配制
        3.2.4 实验动物与细胞
    3.3 试验方法
        3.3.1 免疫原的设计和合成
        3.3.2 免疫原的表征
        3.3.3 动物免疫
        3.3.4 小鼠多抗血清检测
        3.3.5 单克隆抗体的制备
        3.3.6 单克隆抗体的鉴定
        3.3.7 胶体金试纸条的建立与优化
    3.4 结果与讨论
        3.4.1 人工抗原的合成与鉴定
        3.4.2 小鼠多抗血清鉴定
        3.4.3 单克隆细胞株筛选
        3.4.4 单克隆抗体性质鉴定
        3.4.5 胶体金试纸条的建立与优化
    3.5 本章小结
第四章 抗寄生虫药单克隆抗体的制备及免疫学检测技术的建立
    4.1 引言
    4.2 仪器与化学试剂
        4.2.1 实验仪器
        4.2.2 实验材料
        4.2.3 溶液配制
        4.2.4 实验动物和细胞
    4.3 试验方法
        4.3.1 免疫原的设计与合成
        4.3.2 免疫原的表征
        4.3.3 动物免疫
        4.3.4 小鼠多抗血清检测
        4.3.5 单克隆抗体的制备
        4.3.6 单克隆细胞的鉴定
        4.3.7 NIT胶体金试纸条的建立与优化
        4.3.8 CLT的ic-ELISA检测法的建立
    4.4 结果与讨论
        4.4.1 人工抗原的合成与鉴定
        4.4.2 小鼠多抗血清鉴定
        4.4.3 单克隆细胞株筛选
        4.4.4 单克隆抗体性质鉴定
        4.4.5 NIT胶体金试纸条的建立与优化
        4.4.6 CLT的ic-ELISA方法的建立
    4.5 本章小结
第五章 非甾体类抗炎药单克隆抗体的制备及免疫学检测技术的建立
    5.1 引言
    5.2 仪器与化学试剂
        5.2.1 实验仪器
        5.2.2 实验材料
        5.2.3 溶液配制
        5.2.4 实验动物和细胞
    5.3 试验方法
        5.3.1 免疫原的设计和合成
        5.3.2 免疫原的表征
        5.3.3 动物免疫
        5.3.4 小鼠多抗血清检测
        5.3.5 单克隆抗体的制备
        5.3.6 单克隆抗体的鉴定
        5.3.7 胶体金试纸条的建立与优化
    5.4 结果与讨论
        5.4.1 人工抗原的合成与鉴定
        5.4.2 小鼠多抗血清的鉴定
        5.4.3 单克隆细胞株筛选
        5.4.4 单克隆抗体性质鉴定
        5.4.5 胶体金试纸条的建立和优化
    5.5 本章小结
第六章 赛庚啶和吩噻嗪类药物单克隆抗体的制备及免疫学检测技术的建立
    6.1 引言
    6.2 仪器与化学试剂
        6.2.1 实验仪器
        6.2.2 实验材料
        6.2.3 溶液配制
        6.2.4 实验动物和细胞
    6.3 试验方法
        6.3.1 免疫原的设计和合成
        6.3.2 免疫原的表征
        6.3.3 动物免疫
        6.3.4 小鼠多抗血清检测
        6.3.5 单克隆抗体的制备
        6.3.6 单克隆抗体的鉴定
        6.3.7 胶体金试纸条的建立与优化
    6.4 结果与讨论
        6.4.1 人工抗原的合成与鉴定
        6.4.2 小鼠多抗血清鉴定
        6.4.3 单克隆细胞株筛选
        6.4.4 单克隆抗体性质鉴定
        6.4.5 胶体金试纸条的建立与优化
    6.5 本章小结
主要结论
创新点
致谢
参考文献
附录: 作者在攻读博士学位期间发表的论文



本文编号：3839222