低氧诱导因子-1α对牦牛肾小管上皮细胞上皮-间质转化的影响

发布时间：2023-08-17 20:12

　　本研究旨在探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)对牦牛肾小管上皮细胞上皮-间质转化(EMT)的影响。首先对牦牛肾小管上皮细胞进行培养鉴定,并选取第三代细胞对其分别进行药物处理(DMOG组)和不做药物处理(对照组),检测EMT相关基因在mRNA和蛋白水平的表达变化,并观察细胞形态变化。结果表明:使用Ⅰ+Ⅱ型胶原酶可以更好地获得肾小管上皮细胞;免疫荧光结果细胞CK18表达呈阳性,Vimentin和CD31呈阴性表达;qRT-PCR和Western blot结果表明,DMOG组中的HIF-1α,TGF-β1,α-SMA在mRNA和蛋白水平均较对照组有极显著增加(P<0.01),而E-cadherin的表达显著降低(P<0.05);经药物干预后,细胞形态由铺路石样转变为长梭形,经鉴定长梭形细胞为间质细胞。本研究成功建立了牦牛肾小管上皮细胞的分离培养体系,并发现HIF-1α表达上调可以促进牦牛肾小管上皮细胞上皮-间质转化。

【文章页数】：10 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 试验样品
    1.2 主要试剂和仪器
    1.3 牦牛肾小管上皮细胞的分离培养
    1.4 牦牛肾小管上皮细胞的活性测定
    1.5 细胞免疫荧光鉴定
    1.6 实时荧光定量PCR
    1.7 Western blot
    1.8 数据统计分析
2 结 果
    2.1 消化酶的选择
    2.2 生长曲线测定
    2.3 牦牛肾小管上皮细胞的鉴定
    2.4 qRT-PCR检测HIF-1α,TGF-β1,E-cadherin和α-SMA的mRNA表达
    2.5 Western blot检测HIF-1α,TGF-β1,E-cadherin和α-SMA的蛋白表达
    2.6 药物干预前后的细胞形态变化及转化后的细胞鉴定
3 讨 论
4 结 论



本文编号：3842506