兔支气管败血波氏杆菌PCR检测方法的建立及初步应用

发布时间：2023-08-26 04:52

　　兔波氏杆菌病是由支气管败血渡氏杆菌(Bordetella bronchiseptica, Bb),也称兔支气管鲍特杆菌或博德特氏杆菌,是一种能广泛的寄生在家畜、野生动物及实验动物呼吸道上皮细胞纤毛上的革兰氏阴性需氧小杆菌,能引起兔、猪、马、狗、鼠等多种哺乳动物的呼吸道疾病,感染动物主要以鼻炎和支气管肺炎为特征。近年来,也有该菌感染人引起发病的报道,尤其是年幼的儿童和抵抗力较差的老年人。在我国,该茵在兔群中的感染率比较高,无论是幼兔、青年兔、种兔均有感染,给养兔业造成巨大的经济损失。利用FHA基因设计了1对特异性引物,建立了一种PCR检测方法,旨在建立一种简便、快速、敏感、特异的诊断方法,主要实验和结果如下：1.兔支气管败血波氏杆菌的分离和鉴定：采集安徽滁州某兔场送检的疑似兔支气管败血波士杆菌感染的病死幼兔的鼻腔分泌物、肺脏、肝脏样品进行病原菌的分离与鉴定。本实验结合菌落形态、染色镜检、培养特性、血清学实验、生化鉴定和16SrRNAPCR扩增,确定该分离菌为兔支气管败血波氏杆菌。药物敏感实验研究表明：该病菌对强力霉素、氟苯尼考、庆大霉素、丁胺卡那霉素等高度敏感；对卡那霉素、链霉素、麦迪霉...

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【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
文中所引部分缩略语
第一章 文献综述
    1 支气管败血波氏杆菌的病原学
        1.1 细菌的形态和生化特性
        1.2 抗原结构
        1.3 支气管败血波氏杆菌的药物敏感性
    2 流行病学和致病机理
    3 临床症状及病理变化
        3.1 临床症状
        3.2 病理变化
    4 兔支气管败血波氏杆菌的诊断方法
        4.1 微生物学诊断
        4.2 血清学诊断
        4.3 分子生物学诊断
    5 预防与控制
        5.1 药物治疗
        5.2 免疫接种
        5.3 防治
    6 研究目的与意义
    参考文献
第二章 兔支气管败血波氏杆菌的分离和鉴定
    摘要
    1 材料与方法
        1.1 病料来源
        1.2 培养基与血清
        1.3 酶及主要试剂
        1.4 主要的仪器与设备
        1.5 实验动物
        1.6 实验方法
    2 结果与分析
        2.1 分离菌株的形态结构与培养培养特性
        2.2 血清学实验结果
        2.3 生化实验结果
        2.4 药物敏感性实验结果
        2.5 分离株16SrRNA基因PCR扩增结果及测序结果分析
        2.6 分离菌的动物实验结果
    3 讨论
    参考文献
第三章 兔支气管败血波氏杆菌PCR方法的建立
    摘要
    1 材料与方法
        1.1 菌种
        1.2 主要试剂
        1.3 主要仪器与设备
        1.4 方法
    2 结果与分析
        2.1 PCR扩增FHA基因片段结果
        2.2 重组质粒T-FHA的PCR鉴定
        2.3 序列测定及同源性分析
        2.4 PCR条件优化结果分析
        2.5 PCR特异性实验结果分析
        2.6 PCR敏感性实验结果分析
    3 讨论
    参考文献
第四章 PCR方法在临床上的应用
    摘要
    1 材料和方法
        1.1 实验菌株
        1.2 培养基及主要试剂
        1.3 引物
        1.4 主要仪器与设备
        1.5 方法
    2 结果与分析
        2.1 血清学诊断结果
        2.2 PCR方法诊断结果
        2.3 常规血清学检测与PCR检测的对比
    3 讨论
    参考文献
全文总结
致谢



本文编号：3843993