棉酚抗炎活性及作用机制初步研究

发布时间：2023-09-02 10:56

　　棉酚是棉葵科植物及热带桐棉中含有的一种黄色化合物，分子式为1,1′,6,6′,7,7′-六羟基-5,5′-二异丙基-3,3′-二甲基-2,2′-联二萘-8,8′二羟基醛，其中棉花籽实加工形成的棉籽饼粨中也含有大量的棉酚，因其具有抗生育活性，在饲料加工过程中需进行脱毒处理，棉酚生物活性的深入研究也成为了一个热点。除抗生育活性之外，已证实棉酚还具有抗肿瘤、抗病毒、抗寄生虫等活性。本文利用LPS刺激建立小鼠急性肺损伤模型（ALI）及RAW264.7细胞炎性反应模型，分别在体内和体外观察和验证棉酚的抗炎活性，并对TLR信号转导通路NF-κB、ERK、JNK、p38等关键接头蛋白进行检测，对其抗炎作用机制进行初步探索，旨在为棉酚生物学活性的研究补充和提供抗炎活性相关的实验数据和资料。 本实验用LPS刺激小鼠呼吸道，构建ALI模型，并分别使用2.5、5、10、20、40mg/kg等浓度的棉酚对该模型进行处理。首先检测小鼠肺脏干湿比值（W/D）的变化，并对其病理组织学进行观察；测定肺组织MPO活性；其次对肺泡灌洗液（BALF）中总细胞、中性粒细胞、巨噬细胞进行计数，ELISA测定BALF中TNF-α...

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
英文缩写表
引言
第一篇 文献综述
    第一章 棉酚生物活性研究进展
        1 棉酚概述
        2 棉酚的理化性质
        3 棉酚的生物活性
            3.1 抗生育活性
            3.2 抗肿瘤活性
            3.3 抗病毒和抗寄生虫活性
            3.4 抗氧化活性
            3.5 抗炎活性
    第二章 LPS 致炎机制研究进展
        1 炎症概述
        2 炎症的免疫学研究
            2.1 免疫炎症反应
            2.2 LPS 诱导的免疫炎症反应中主要的细胞因子
        3 LPS 诱导的信号转导通路
            3.1 NF-kB 信号转导通路
            3.2 MAPKs 信号转导通路
        4 抗炎药物的研发
            4.1 细胞因子抑制剂
            4.2 趋化因子及受体抑制剂
            4.3 MAPKs 信号转导通路抑制剂
            4.4 转录因子抑制剂
第二篇 实验部分
    第一章 棉酚对 LPS 诱导的急性肺损伤小鼠的保护作用
        1 材料
            1.1 动物
            1.2 仪器和设备
            1.3 药品和试剂
            1.4 试验所需试剂的配制
        2 方法
            2.1 小鼠急性肺损伤模型的构建及药物处理
            2.2 血常规分析
            2.3 小鼠肺组织湿干重比值（W/D）的测定
            2.4 小鼠肺组织的病理学评估
            2.5 小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞计数
            2.6 小鼠髓过氧化物酶（MPO）活性的测定
            2.7 小鼠支气管肺泡灌洗液 TNF-α, IL-1 及 IL-6 细胞因子的测定
            2.8 小鼠肺组织蛋白免疫印迹实验(Western blot)
            2.9 数据处理及统计
        3 结果
            3.1 棉酚对循环系统白细胞的影响
            3.2 棉酚对 LPS 诱导的 ALI 小鼠肺组织的湿干重比值（W/D）的影响
            3.3 棉酚对 LPS 诱导的 ALI 小鼠肺组织病理学变化的影响
            3.4 棉酚对 LPS 诱导的 ALI 小鼠 BALF 中总细胞、中性白细胞及巨噬细胞数目的影响
            3.5 棉酚对 LPS 诱导的 ALI 小鼠 MPO 活性的影响
            3.6 棉酚对 LPS 诱导的 ALI 小鼠 BALF 中 TNF-α，IL-1β和 IL-6 产生的影响
            3.7 棉酚对 LPS 诱导的 ALI 小鼠 NF-κB 信号转导通路的影响
            3.8 棉酚对 LPS 诱导的 ALI 小鼠 MAPKs 信号转导通路的影响
        4 讨论
        5 小结
    第二章 棉酚对 LPS 刺激的 RAW264.7 细胞的保护作用
        1 材料
            1.1 细胞
            1.2 仪器设备
            1.3 药品和试剂
            1.4 试验所需试剂的配制
        2 方法
            2.1 MTT 法检测棉酚对 RAW264.7 细胞的毒性作用
            2.2 qRT-PCR 测定 RAW264.7 细胞 TNF-α、IL-1β和 IL-6 的基因表达水平
            2.3 ELISA 检测 RAW264.7 细胞 TNF-α、IL-1β和 IL-6 的蛋白表达水平
            2.4 免疫印迹实验（Western blot）
            2.5 数据的统计与分析
        3 结果
            3.1 棉酚对 RAW264.7 细胞活性的影响
            3.2 棉酚对 LPS 刺激的 RAW264.7 细胞 TNF-α、IL-1β和 IL-6 基因表达的影响
            3.3 棉酚对 LPS 刺激的 RAW264.7 细胞 TNF-α、IL-1β和 IL-6 蛋白表达的影响
            3.4 棉酚对 LPS 刺激的 RAW264.7 细胞 NF-κB 信号转导通路的影响
            3.5 棉酚对 LPS 刺激的 RAW264.7 细胞 MAPKs 信号转导通路的影响
        4 讨论
        5 小结
    第三章 结论
参考文献
在学期间所取得的研究成果
导师简介
作者简介
致谢



本文编号：3845074