Caco-2细胞对不同形态锰的吸收及机制研究
发布时间：2023-10-27 19:50
在本实验室近期系列鸡锰营养研究成果的基础上,本论文采用Caco-2细胞模型进行四个试验,研究Caco-2细胞对不同络合强度有机锰与无机锰的吸收特点及差异,并进一步探讨其吸收的分子机制。 试验一首先构建Caco-2体外细胞模型,将Caco-2细胞接种于Transwell细胞转运培养槽的聚碳酸酯微孔滤膜上,在37℃C和5%CO2浓度培养条件下培养21d,细胞跨膜电阻值达到659Ω·cm2,肠腔侧(AP)碱性磷酸酶活性显著高于基底侧(BL)酶活性(P<0.01)。表明本实验室构建的Caco-2细胞模型在形态上与小肠上皮细胞相似,细胞已产生极性,且细胞间已形成紧密连接,可作为小肠吸收的体外模型。 试验二采用Caco-2细胞模型研究无机锰的吸收特点,共包括2个试验。试验1研究无机硫酸锰在Caco-2细胞中吸收随时间变化的规律,根据锰的吸收转运与孵育时间的曲线关系,在二者的线性范围内确定细胞最佳孵育时间,为在细胞最敏感状态下研究锰的吸收提供试验依据。采用单因子完全随机试验设计。设细胞孵育时间分别为0、10、20、40、60、80、100和120min共8个处理组。每个处理6个重复,分别研究不...
【文章页数】：104 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
附表
摘要
Abstract
目录
表目录
图目录
英文缩略表
第一章 绪论
1.1 矿物元素吸收的研究方法
1.1.1 体内法
1.1.2 体外法
1.1.3 同位素示踪技术
1.2 锰吸收及其机制研究进展
1.2.1 锰的吸收、代谢及排泄
1.2.2 锰的吸收特点及方式
1.2.3 锰吸收分子机制的研究进展
1.2.4 有机锰等有机微量元素吸收机制假说
1.3 本研究的立体依据和研究目的
1.4 本研究的技术路线
第二章 Caco-2细胞吸收模型的构建及评估
2.1 前言
2.2 材料与方法
2.2.1 试验仪器与材料
2.2.2 试验方法
2.2.3 数据统计分析
2.3 结果
2.3.1 细胞形态
2.3.2 跨膜电阻值TEER
2.3.3 ALP活性
2.4 讨论
2.5 小结
第三章 Caco-2细胞对无机锰的吸收特点
3.1 前言
3.2 材料与方法
3.2.1 试验设计与处理
3.2.2 动物与饲粮
3.2.3 Caco-2细胞培养与处理
3.2.4 样品采集与制备
3.2.5 样品分析
3.3 数据统计与分析
3.4 结果与分析
3.4.1 28日龄肉公鸡小肠段食糜上清中锰含量(试验1)
3.4.2 Caco-2细胞在不同时间对无机硫酸锰的吸收和摄取(试验2)
3.4.3 Caco-2细胞对无机硫酸锰的吸收及其动力学(试验3)
3.4.4 添加锰对Caco-2细胞中DMT1和FPN1 mRNA表达的影响
3.5 讨论
3.5.1 Caco-2细胞对无机锰吸收转运最佳孵育时间的确定
3.5.2 Caco-2细胞对无机锰的吸收及其动力学
3.5.3 无机锰对Caco-2细胞中DMT1和FPN1 mRNA表达的影响
3.6 小结
第四章 Caco-2细胞对不同形态锰的吸收特点
4.1 前言
4.2 材料与方法
4.2.1 试验设计与处理
4.2.2 Caco-2细胞培养与处理
4.2.3 样品采集与制备
4.2.4 样品分析
4.3 数据统计分析
4.4 结果与分析
4.4.1 Caco-2细胞对不同形态锰的吸收及其动力学
4.4.2 Caco-2细胞对不同形态锰的摄取及其动力学
4.4.3 Caco-2细胞对不同形态锰的转运及其动力学
4.5 讨论
4.6 小结
第五章 Caco-2细胞对不同形态锰吸收的分子机制
5.1 前言
5.2 材料与方法
5.2.1 试验仪器与材料
5.2.2 试验设计与处理
5.2.3 Caco-2细胞培养与处理
5.2.4 样品采集与制备
5.2.5 样品分析
5.3 数据统计与分析
5.4 结果与分析
5.4.1 Caco-2细胞对不同形态锰的吸收
5.4.2 不同形态锰对Caco-2细胞中DMT1和FPN1 mRNA表达的影响
5.4.3 不同形态锰对Caco-2细胞中B0AT1和LAT2 mRNA表达的影响
5.4.4 不同形态锰对Caco-2细胞中rBAT和y+LAT1 mRNA表达的影响
5.4.5 不同形态锰对Caco-2细胞中EAAT3 mRNA表达的影响
5.5 讨论
5.6 小结
第六章 主要结论、突出创新点及有待进一步研究的问题
主要结论
突出创新点
有待进一步研究的问题
附表
参考文献
致谢
作者简历
本文编号：3857159
【文章页数】：104 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
附表
摘要
Abstract
目录
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第一章 绪论
1.1 矿物元素吸收的研究方法
1.1.1 体内法
1.1.2 体外法
1.1.3 同位素示踪技术
1.2 锰吸收及其机制研究进展
1.2.1 锰的吸收、代谢及排泄
1.2.2 锰的吸收特点及方式
1.2.3 锰吸收分子机制的研究进展
1.2.4 有机锰等有机微量元素吸收机制假说
1.3 本研究的立体依据和研究目的
1.4 本研究的技术路线
第二章 Caco-2细胞吸收模型的构建及评估
2.1 前言
2.2 材料与方法
2.2.1 试验仪器与材料
2.2.2 试验方法
2.2.3 数据统计分析
2.3 结果
2.3.1 细胞形态
2.3.2 跨膜电阻值TEER
2.3.3 ALP活性
2.4 讨论
2.5 小结
第三章 Caco-2细胞对无机锰的吸收特点
3.1 前言
3.2 材料与方法
3.2.1 试验设计与处理
3.2.2 动物与饲粮
3.2.3 Caco-2细胞培养与处理
3.2.4 样品采集与制备
3.2.5 样品分析
3.3 数据统计与分析
3.4 结果与分析
3.4.1 28日龄肉公鸡小肠段食糜上清中锰含量(试验1)
3.4.2 Caco-2细胞在不同时间对无机硫酸锰的吸收和摄取(试验2)
3.4.3 Caco-2细胞对无机硫酸锰的吸收及其动力学(试验3)
3.4.4 添加锰对Caco-2细胞中DMT1和FPN1 mRNA表达的影响
3.5 讨论
3.5.1 Caco-2细胞对无机锰吸收转运最佳孵育时间的确定
3.5.2 Caco-2细胞对无机锰的吸收及其动力学
3.5.3 无机锰对Caco-2细胞中DMT1和FPN1 mRNA表达的影响
3.6 小结
第四章 Caco-2细胞对不同形态锰的吸收特点
4.1 前言
4.2 材料与方法
4.2.1 试验设计与处理
4.2.2 Caco-2细胞培养与处理
4.2.3 样品采集与制备
4.2.4 样品分析
4.3 数据统计分析
4.4 结果与分析
4.4.1 Caco-2细胞对不同形态锰的吸收及其动力学
4.4.2 Caco-2细胞对不同形态锰的摄取及其动力学
4.4.3 Caco-2细胞对不同形态锰的转运及其动力学
4.5 讨论
4.6 小结
第五章 Caco-2细胞对不同形态锰吸收的分子机制
5.1 前言
5.2 材料与方法
5.2.1 试验仪器与材料
5.2.2 试验设计与处理
5.2.3 Caco-2细胞培养与处理
5.2.4 样品采集与制备
5.2.5 样品分析
5.3 数据统计与分析
5.4 结果与分析
5.4.1 Caco-2细胞对不同形态锰的吸收
5.4.2 不同形态锰对Caco-2细胞中DMT1和FPN1 mRNA表达的影响
5.4.3 不同形态锰对Caco-2细胞中B0AT1和LAT2 mRNA表达的影响
5.4.4 不同形态锰对Caco-2细胞中rBAT和y+LAT1 mRNA表达的影响
5.4.5 不同形态锰对Caco-2细胞中EAAT3 mRNA表达的影响
5.5 讨论
5.6 小结
第六章 主要结论、突出创新点及有待进一步研究的问题
主要结论
突出创新点
有待进一步研究的问题
附表
参考文献
致谢
作者简历
本文编号：3857159
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