FSH处理对鸡卵泡颗粒细胞凋亡的影响及差异表达miRNAs的研究

发布时间：2023-10-31 18:43

　　

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【学位级别】：硕士

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ABSTRACT
缩略词中英文对照(Abbreviation)
第一篇 文献综述
    1 家禽卵巢及卵泡发育概述
        1.1 家禽的卵巢及卵泡发育
        1.2 家禽卵泡颗粒细胞
        1.3 家禽卵泡颗粒细胞与卵泡闭锁的关系
    2 卵泡刺激素(FSH)概述
        2.1 卵泡刺激素
        2.2 卵泡刺激素的作用机制
        2.3 卵泡刺激素与卵泡颗粒细胞的关系
    3 miRNA概述
        3.1 miRNA及其特征
        3.2 miRNA在动物生殖中的研究进展
    4 本研究的目的和意义
    参考文献
第二篇 试验部分
    第一章 FSH对鸡小黄卵泡颗粒细胞凋亡的调控作用
        1 实验材料
            1.1 实验动物及样品采集
            1.2 主要试剂
            1.3 主要仪器
            1.4 主要溶液及其配置
        2 实验方法
            2.1 鸡小黄卵泡颗粒细胞的分离培养
            2.2 放射免疫法测定颗粒细胞上清液中孕酮含量
            2.3 流式细胞术检测细胞凋亡情况
            2.4 颗粒细胞总RNA的提取及其浓度和纯度检测
                2.4.1 RNA的提取
                2.4.2 RNA浓度和纯度检测
            2.5 反转录cDNA的合成
            2.6 实时荧光定量PCR
            2.7 数据分析
        3 实验结果
            3.1 鸡小黄卵泡颗粒细胞形态观察
            3.2 放射免疫法测定颗粒细胞上清液中孕酮含量
            3.3 流式细胞术检测细胞凋亡情况
            3.4 总RNA质量检测
            3.5 Caspase-3基因mRNA的表达情况
        4 讨论
            4.1 关于鸡卵泡颗粒细胞的分离培养
            4.2 关于FSH与鸡卵泡颗粒细胞的关系
        5 小结
        参考文献
    第二章 应用高通量测序技术筛选FSH处理鸡卵泡颗粒细胞后差异表达的miRNAs
        1 实验材料
            1.1 鸡卵泡颗粒细胞
            1.2 主要试剂
            1.3 主要仪器
            1.4 主要溶液及其配置
            1.5 miRNA表达谱测序
            1.6 生物学工具：主要数据库及软件
        2 实验方法
            2.1 鸡卵泡颗粒细胞样品RNA的提取及浓度、纯度检测
            2.2 高通量测序筛选FSH处理鸡卵泡颗粒细胞后差异表达的miRNAs
            2.3 差异表达显著的四个miRNAs的qRT-PCR验证
        3 实验结果
            3.1 鸡卵泡颗粒细胞总RNA的提取
            3.2 高通量测序筛选FSH处理鸡卵泡颗粒细胞后差异表达的miRNAs
                3.2.1 FSH实验组与ITS对照组的小RNA文库的构建
                3.2.2 筛选FSH处理鸡卵泡颗粒细胞后差异表达的miRNAs
            3.3 对差异表达显著的四个miRNAs进行qRT-PCR验证
            3.4 差异表达的miRNAs靶基因的预测及其生物信息学分析
        4 讨论
        5 小结
        参考文献
全文结论
全文创新点
致谢
附录
攻读硕士期间发表的论文



本文编号：3859273