血管内皮生长因子对水牛卵母细胞体外成熟的影响

发布时间：2023-11-18 09:48

　　目前,卵母细胞体外成熟培养技术已取得很大进展,但体外成熟得到的卵母细胞仍存在发育能力较差的问题。本研究旨在探讨血管内皮生长因子(VEGF)对水牛卵母细胞体外成熟及其后续胚胎发育的影响,并初步研究其相关作用机制,以期进一步完善水牛体外成熟培养体系,提高体外胚胎生产效率。 首先,初步探讨了VEGF及其受体VEGFR1与VEGFR2在卵泡发育和卵丘卵母细胞复合物(COCs)体外成熟培养过程中的表达变化规律。VEGF在卵巢组织表达的免疫组织化学检测结果发现,不同时期卵泡中均有VEGF表达,且主要在颗粒细胞中表达。水牛COCs中VEGF表达情况的免疫荧光染色检测结果显示,VEGF主要在卵丘细胞中表达,在卵母细胞不表达。水牛COCs在体外成熟过程中的VEGF及其受体表达变化实时荧光定量PCR (Q-PCR)检测结果发现,VEGF在成熟培养过程中(0h、6h、12h与24h)的表达呈下降趋势,其中VEGF在成熟前(0h)表达量显著高于成熟6h(P<0.05),而成熟6h、12h与24h间VEGF表达量差异不显著(P>0.05)；VEGFR1与VEGFR2在成熟过程中均呈现出先升后降的趋势...

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一部分 文献综述
    1 卵母细胞体外成熟
        1.1 卵母细胞的发生
        1.2 卵母细胞减数分裂恢复调控
        1.3 卵母细胞体外成熟培养及其影响因素
        1.4 颗粒细胞对卵母细胞发育的影响
    2 血管内皮生长因子(VEGF)
        2.1 VEGF的分子结构
        2.2 VEGF的信号通路与生物学功能
        2.3 VEGF在卵巢发育中表达情况及其功能
        2.4 VEGF对卵母细胞成熟的影响
    3 研究目的与意义
第二部分 试验部分
    第一章 内源性VEGF在卵泡和COCs中的表达规律的初步研究
        1 材料与方法
            1.1 材料
            1.2 方法
            1.3 统计分析
        2 结果与分析
            2.1 免疫组化检测卵泡发育过程中VEGF的表达情况
            2.2 水牛卵丘卵母细胞复合物VEGF免疫荧光染色
            2.3 卵母细胞体外成熟过程中VEGF及其受体mRNA的表达情况
        3 讨论
        4 结论
    第二章 VEGF对水牛卵母细胞体外成熟培养效果的影响及其作用机制的研究
        1 材料与方法
            1.1 实验材料
            1.2 主要仪器设备及试剂
            1.3 试验方法
            1.4 试验设计
            1.5 统计分析
        2 结果与分析
            2.1 VEGF对水牛卵母细胞体外成熟效果的影响
            2.2 VEGF对水牛卵母细胞IVF早期胚胎发育的影响
            2.3 VEGF对水牛卵母细胞SCNT早期胚胎发育的影响
            2.4 VEGF对水牛裸卵体外成熟培养的影响
            2.5 VEGF对卵丘细胞凋亡的影响
            2.6 VEGF对凋亡相关基因表达的影响
            2.7 VEGF对卵丘细胞发育相关基因表达的影响
        3 讨论
        4 结论
参考文献
附录1
附表2 英文中文对照表
致谢
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本文编号：3865046