日粮营养水平对山羊瘤胃上皮细胞凋亡和自噬的影响

发布时间：2023-12-04 18:39

　　本研究包括三个部分：1、日粮精料水平对山羊瘤胃上皮细胞凋亡和自噬的影响；2、饥饿对山羊瘤胃上皮细胞自噬和凋亡的影响；3、体外研究pH和SCFA对原代培养山羊瘤胃上皮细胞凋亡和自噬的影响。1日粮精料水平对山羊瘤胃上皮细胞凋亡和自噬的影响将15只装有永久性瘤胃瘘管的青年杂交山羊(波尔山羊×淮南羊)分为精料组(HC组,n=9)和粗料组(HF组,n=6),单圈饲养,自由饮水,两组山羊每天饲喂两次,时间点分别是8：00和17：00,饲喂80天后采样。山羊屠宰后检测表明, HC组山羊终体重、瘤胃干重、5×5cm。瘤胃上皮重均显著高于HF组(P<0.05)；HC组山羊瘤胃液pH显著低于HF组(P<0.01)；运用气相色谱方法检测瘤胃液SCFA,结果显示HC组山羊瘤胃液中,TSCFA、乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、正戊酸及异戊酸的浓度均显著高与HF组(P<0.01)；Real-time Q-PCR方法检测细胞凋亡相关基因p53、Bcl-2、 Bax、Caspase3 及 Caspase9的表达,结果显示HC组山羊瘤胃上皮p53、Bcl-2、Bax、 Caspase3和Caspase96的...

【文章页数】：92 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
本文部分缩写的中英文对照
引言
第一篇 文献综述
    第一章 瘤胃上皮
        1 瘤胃上皮的结构
            1.1 瘤胃上皮的解剖学特点
            1.2 瘤胃上皮的细胞学特点
        2 瘤胃上皮的生长发育
        3 日粮结构对瘤胃的影响
        参考文献
    第二章 细胞凋亡
        1 细胞凋亡的概况
        2 细胞凋亡的发生过程和分子机制
            2.1 细胞凋亡的发生过程
            2.2 细胞凋亡的分子机制
        3 细胞凋亡的生理学特点
        参考文献
    第三章 细胞自噬
        1 细胞自噬的概况
        2 细胞自噬的发生过程和分子机制
            2.1 自噬的发生过程
            2.2 自噬的分子机制
        3 细胞自噬的生理作用
        参考文献
第二篇 试验研究
    第四章 日粮精料水平对山羊瘤胃上皮细胞凋亡和自噬的影响
        1 材料与方法
            1.1 试验设计及动物饲养
            1.2 样品采集
            1.3 主要仪器和试剂
            1.4 瘤胃液pH的测定
            1.5 瘤胃液内短链脂肪酸(SCFA)的测定
            1.6 Real-time Q-PCR方法检测凋亡、自噬相关基因的表达
            1.7 TUNEL凋亡染色
            1.8 数据分析
        2 结果与分析
            2.1 日粮精料水平对山羊体重的影响
            2.2 日粮精料水平对山羊瘤胃重的影响
            2.3 日粮精料水平对山羊瘤胃pH和SCFA浓度的影响
            2.4 日粮精料水平对山羊瘤胃上皮凋亡相关基因mRNA表达的影响
            2.5 日粮精料水平对山羊瘤胃上皮自噬相关基因mRNA表达的影响
            2.6 凋亡和自噬相关基因与pH、SCFA相关性分析
            2.7 日粮精料水平对山羊瘤胃上皮TUNEL细胞凋亡检测的影响
        3 讨论
        4 小结
        参考文献
    第五章 饥饿对山羊瘤胃上皮细胞自噬和凋亡的影响
        1 材料与方法
            1.1 试验设计与动物饲养
            1.2 样品采集
            1.3 主要仪器和试剂
            1.4 瘤胃液pH的测定
            1.5 瘤胃液内短链脂肪酸(SCFA)的测定
            1.6 Real-time Q-PCR方法检测自噬、凋亡相关基因的表达
            1.7 透射电镜制样与观察
            1.8 Western blot检测饥饿山羊瘤胃上皮细胞自噬相关蛋白LC3的表达以及ERK和AKT的磷酸化
            1.9 数据处理
        2 结果与分析
            2.1 饥饿对山羊瘤胃pH和SCFA浓度的影响
            2.2 饥饿山羊透射电镜观察自噬泡、线粒体和细胞核
            2.3 饥饿对山羊瘤胃上皮自噬相关基因mRNA表达的影响
            2.4 饥饿对山羊瘤胃上皮凋亡相关基因mRNA表达的影响
            2.5 自噬和凋亡相关基因与pH、SCFA相关性分析
            2.6 自噬和凋亡相关基因与饥饿相关性分析
            2.7 饥饿对山羊瘤胃上皮LC3蛋白表达的影响
            2.8 饥饿对山羊瘤胃上皮ERK磷酸化的影响
            2.9 饥饿对山羊瘤胃上皮AKT磷酸化的影响
        3 讨论
        4 小结
        参考文献
    第六章 体外研究pH和SCFA对原代培养山羊瘤胃上皮细胞凋亡和自噬的影响
        1 材料与方法
            1.1 主要试剂和仪器
            1.2 样品采集
            1.3 瘤胃上皮细胞的分离和原代培养
            1.4 pH和SCFA处理山羊瘤胃上皮细胞后检测凋亡、自噬相关基因的表达
            1.5 数据处理
        2 结果与分析
            2.1 pH和SCFA对山羊瘤胃上皮细胞凋亡相关基因mRNA表达的影响
            2.2 pH和SCFA对山羊瘤胃上皮细胞自噬相关基因mRNA表达的影响
            2.3 凋亡和自噬相关基因与pH、SCFA效应分析
        3 讨论
        4 小结
        参考文献
全文结论
本文创新点
致谢
攻读硕士学位期间发表的论文



本文编号：3870492