Wnt/β-catenin协同褪黑素、PI3K信号通路对猪卵巢颗粒细胞发育的影响
发布时间：2023-12-10 07:32
Wnt/β-catenin通路参与机体许多重要生理活动,包括细胞命运决定、胚胎早期发育、神经系统发育、生殖系统发育以及肿瘤发生等,在卵泡发育、颗粒细胞生长和卵母细胞成熟过程中扮演至关重要的角色。卵巢颗粒细胞的增殖、凋亡以及类固醇激素的分泌依赖于Wnt/β-catenin通路的调控。褪黑素(Melatonin)作为一种重要的吲哚胺类激素,在神经系统发育、卵巢卵泡发育和抗肿瘤中体现出色功能。褪黑素在卵巢颗粒细胞的发育中扮演重要的调控作用。越来越多的研究结果证实Wnt/β-catenin通路参与了褪黑素在机体多个重要生理活动中的调节,但是否参与了褪黑素对卵巢颗粒细胞发育的调控仍需研究证实。磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)通路参与了细胞命运决定,调控高等生物神经系统发育和卵巢发育等重要生长发育活动,同时也与一些人类疾病,包括糖尿病、阿尔茨海默病甚至癌症等紧密关联。Wnt/β-catenin通路与PI3K/Akt通路在肿瘤形成和许多其它生理活动中的互作被越来越多的研究结果证实,但目前尚无文献报道Wnt/β-catenin通路与PI3K/...
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
文献综述
第一章 Wnt/β-catenin信号转导通路研究进展
1.1 Wnt/β-catenin通路组成
1.2 Wnt/β-catenin通路与卵巢发育
1.3 Wnt/β-catenin通路与褪黑素对神经系统的保护作用
1.4 Wnt/β-catenin通路与PI3K/Akt通路互作
第二章 褪黑素研究进展
2.1 褪黑素受体
2.2 褪黑素抗氧化功能
2.2.1 以电子供体的形式与自由基直接结合达到清除自由基的作用
2.2.2 调控抗氧化酶类活性及表达
2.3 褪黑素对卵巢发育的影响
2.4 褪黑素与卵母细胞成熟及胚胎发育
第三章 PI3K信号转导通路研究进展
3.1 PI3K信号转导通路构成
3.2 PI3K信号转导通路对卵巢、卵母细胞发育的影响
3.3 PI3K信号转导通路与卵巢肿瘤
3.4 本研究目的与意义
试验研究
第四章 Wnt/β-catenin通路对猪卵巢颗粒细胞增殖、凋亡的影响
4.1 前言
4.2 材料与方法
4.2.1 主要仪器
4.2.2 主要试验试剂
4.2.3 猪卵巢采集和运送
4.2.4 猪卵巢细胞收集和体外培养
4.2.5 猪卵巢颗粒细胞的鉴定
4.2.6 猪卵巢颗粒细胞增殖活力检测
4.2.7 RNA提取与qRT-PCR
4.2.8 猪卵巢颗粒细胞蛋白提取与免疫印迹
4.2.9 统计分析
4.3 试验结果与分析
4.3.1 猪卵巢颗粒细胞体外培养与细胞鉴定
4.3.2 IWR-1-endo降低猪卵巢颗粒细胞增殖活力
4.3.3 IWR-1-endo抑制Wnt/β-catenin通路调控猪卵巢颗粒细胞周期基因表达
4.3.4 IWR-1-endo抑制Wnt/β-catenin通路诱导猪卵巢颗粒凋亡相关基因表达
4.4 讨论
4.5 小结
第五章 Wnt通路对猪卵巢颗粒细胞类固醇激素合成和性腺激素受体相关基因表达的影响
5.1 前言
5.2 材料与方法
5.2.1 主要仪器
5.2.2 主要试验试剂
5.2.3 猪卵巢采集和运送
5.2.4 猪卵巢颗粒细胞收集和体外培养
5.2.4 RNA提取与qRT-PCR
5.2.5 猪卵巢颗粒细胞蛋白提取及WesternBlot
5.2.6 统计分析
5.3 试验结果与分析
5.3.1 无FSH培养体系中IWR-1-endo抑制Wnt/β-catenin通路
5.3.2 FSH影响Wnt/β-catenin通路对CYP19A1和StAR基因的调控
5.3.3 FSH影响Wnt/β-catenin通路对性腺激素受体基因和CCND2基因的调控
5.4 讨论
5.5 小结
第六章 褪黑素通过Wnt/β-catenin通路调控猪卵巢颗粒细胞增殖、凋亡和类固醇激素生成
6.1 前言
6.2 材料与方法
6.2.1 主要仪器
6.2.2 主要试验试剂
6.2.3 猪卵巢采集和运送
6.2.4 猪卵巢颗粒细胞收集和体外培养
6.2.5 猪卵巢颗粒细胞增殖活力检测
6.2.6 RNA提取与qRT-PCR
6.2.7 猪卵巢颗粒细胞蛋白提取与WesternBlot
6.2.8 统计分析
6.3 试验结果与分析
6.3.1 不同浓度褪黑素对猪卵巢颗粒细胞增殖活力的影响
6.3.2 褪黑素对Wnt/β-catenin通路的影响
6.3.3 褪黑素调控猪卵巢颗粒细胞细胞周期和细胞凋亡
6.3.4 褪黑素调控猪卵巢颗粒细胞类固醇激素合成相关基因表达
6.4 讨论
6.5 小结
第七章 抑制PI3K通路对Wnt/β-catenin通路的影响
7.1 前言
7.2 材料与方法
7.2.1 主要仪器
7.2.2 主要试剂
7.2.3 猪卵巢采集和运送
7.2.4 猪卵巢颗粒细胞收集和体外培养
7.2.5 猪卵巢颗粒细胞增殖活力检测
7.2.6 RNA提取与qRT-PCR
7.2.7 猪卵巢颗粒细胞蛋白质提取与WesternBlot
7.2.8 统计分析
7.3 试验结果与分析
7.3.1 不同浓度Wortmannin对猪卵巢颗粒细胞增殖活力的影响
7.3.2 不同浓度Wortmannin对猪卵巢颗粒细胞Wnt/β-catenin通路的影响
7.3.3 Wortmannin处理猪卵巢颗粒细胞下调CYP19A1和CYP11A1基因表达
7.3.4 Wortmannin处理猪卵巢颗粒细胞调控性腺激素受体和凋亡相关基因的表达.
7.4 讨论
7.5 小结
结论
参考文献
附录一
附录二
附录三
致谢
作者简介
本文编号：3872058
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
文献综述
第一章 Wnt/β-catenin信号转导通路研究进展
1.1 Wnt/β-catenin通路组成
1.2 Wnt/β-catenin通路与卵巢发育
1.3 Wnt/β-catenin通路与褪黑素对神经系统的保护作用
1.4 Wnt/β-catenin通路与PI3K/Akt通路互作
第二章 褪黑素研究进展
2.1 褪黑素受体
2.2 褪黑素抗氧化功能
2.2.1 以电子供体的形式与自由基直接结合达到清除自由基的作用
2.2.2 调控抗氧化酶类活性及表达
2.3 褪黑素对卵巢发育的影响
2.4 褪黑素与卵母细胞成熟及胚胎发育
第三章 PI3K信号转导通路研究进展
3.1 PI3K信号转导通路构成
3.2 PI3K信号转导通路对卵巢、卵母细胞发育的影响
3.3 PI3K信号转导通路与卵巢肿瘤
3.4 本研究目的与意义
试验研究
第四章 Wnt/β-catenin通路对猪卵巢颗粒细胞增殖、凋亡的影响
4.1 前言
4.2 材料与方法
4.2.1 主要仪器
4.2.2 主要试验试剂
4.2.3 猪卵巢采集和运送
4.2.4 猪卵巢细胞收集和体外培养
4.2.5 猪卵巢颗粒细胞的鉴定
4.2.6 猪卵巢颗粒细胞增殖活力检测
4.2.7 RNA提取与qRT-PCR
4.2.8 猪卵巢颗粒细胞蛋白提取与免疫印迹
4.2.9 统计分析
4.3 试验结果与分析
4.3.1 猪卵巢颗粒细胞体外培养与细胞鉴定
4.3.2 IWR-1-endo降低猪卵巢颗粒细胞增殖活力
4.3.3 IWR-1-endo抑制Wnt/β-catenin通路调控猪卵巢颗粒细胞周期基因表达
4.3.4 IWR-1-endo抑制Wnt/β-catenin通路诱导猪卵巢颗粒凋亡相关基因表达
4.4 讨论
4.5 小结
第五章 Wnt通路对猪卵巢颗粒细胞类固醇激素合成和性腺激素受体相关基因表达的影响
5.1 前言
5.2 材料与方法
5.2.1 主要仪器
5.2.2 主要试验试剂
5.2.3 猪卵巢采集和运送
5.2.4 猪卵巢颗粒细胞收集和体外培养
5.2.4 RNA提取与qRT-PCR
5.2.5 猪卵巢颗粒细胞蛋白提取及WesternBlot
5.2.6 统计分析
5.3 试验结果与分析
5.3.1 无FSH培养体系中IWR-1-endo抑制Wnt/β-catenin通路
5.3.2 FSH影响Wnt/β-catenin通路对CYP19A1和StAR基因的调控
5.3.3 FSH影响Wnt/β-catenin通路对性腺激素受体基因和CCND2基因的调控
5.4 讨论
5.5 小结
第六章 褪黑素通过Wnt/β-catenin通路调控猪卵巢颗粒细胞增殖、凋亡和类固醇激素生成
6.1 前言
6.2 材料与方法
6.2.1 主要仪器
6.2.2 主要试验试剂
6.2.3 猪卵巢采集和运送
6.2.4 猪卵巢颗粒细胞收集和体外培养
6.2.5 猪卵巢颗粒细胞增殖活力检测
6.2.6 RNA提取与qRT-PCR
6.2.7 猪卵巢颗粒细胞蛋白提取与WesternBlot
6.2.8 统计分析
6.3 试验结果与分析
6.3.1 不同浓度褪黑素对猪卵巢颗粒细胞增殖活力的影响
6.3.2 褪黑素对Wnt/β-catenin通路的影响
6.3.3 褪黑素调控猪卵巢颗粒细胞细胞周期和细胞凋亡
6.3.4 褪黑素调控猪卵巢颗粒细胞类固醇激素合成相关基因表达
6.4 讨论
6.5 小结
第七章 抑制PI3K通路对Wnt/β-catenin通路的影响
7.1 前言
7.2 材料与方法
7.2.1 主要仪器
7.2.2 主要试剂
7.2.3 猪卵巢采集和运送
7.2.4 猪卵巢颗粒细胞收集和体外培养
7.2.5 猪卵巢颗粒细胞增殖活力检测
7.2.6 RNA提取与qRT-PCR
7.2.7 猪卵巢颗粒细胞蛋白质提取与WesternBlot
7.2.8 统计分析
7.3 试验结果与分析
7.3.1 不同浓度Wortmannin对猪卵巢颗粒细胞增殖活力的影响
7.3.2 不同浓度Wortmannin对猪卵巢颗粒细胞Wnt/β-catenin通路的影响
7.3.3 Wortmannin处理猪卵巢颗粒细胞下调CYP19A1和CYP11A1基因表达
7.3.4 Wortmannin处理猪卵巢颗粒细胞调控性腺激素受体和凋亡相关基因的表达.
7.4 讨论
7.5 小结
结论
参考文献
附录一
附录二
附录三
致谢
作者简介
本文编号：3872058
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