DON与AFB 1 单一及联合染毒对小鼠肠道损伤的研究
发布时间:2024-01-06 10:58
霉菌毒素是由各种霉菌在特定环境下产生的一类天然致癌物质,广泛存在于农产品和饲料中,对人类和动物的健康造成了严重威胁。其中,脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)和黄曲霉毒素B1(AFB1)是饲料及其原料中污染率和污染水平最高的两种霉菌毒素。近年来,动物因摄入霉菌毒素污染饲料而造成中毒的现象时有发生,严重影响了畜禽养殖业的发展。霉菌毒素及其联合毒性研究已成为各国学者研究的热点。但目前罕见DON与AFB1两者联合染毒对小鼠肠道损伤的报道。为此,本试验选择DON与AFB1两种毒素,通过比较两种毒素单一与联合作用对小鼠肠道功能的影响,旨在为DON与AFB1联合毒性研究提供试验依据。选择18日龄昆明系雄性小鼠96只,随机分为4组,分别为(1)对照组,每天灌服生理盐水;(2)DON组,每天灌服500μg·kg-1 DON;(3)AFB1组,每天灌服200μg·kg-1AFB1;(4)DON+AFB1
【文章页数】:65 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
致谢
中文摘要
ABSTRACT
缩写和符号清单
文献综述
引言
1 材料与方法
1.1 试验动物
1.2 试验材料与仪器
1.3 试验溶液的配制
1.4 试验动物的分组及饲养管理
1.4.1 试验动物分组
1.4.2 试验动物饲养管理
1.5 样品的采集与处理
1.6 血清和十二指肠中蛋白含量的测定
1.7 十二指肠中氧化与抗氧化指标的测定
1.8 十二指肠中通透性相关指标的测定
1.9 回肠紧密连接蛋白Occludin和ZO-1mRNA表达量的测定
1.9.1 RNA的抽提(操作均在4℃进行)
1.9.2 逆转录合成cDNA
1.9.3 实时定量PCR
1.10 肠道菌群多样性变化检测
1.10.1 样品检测
1.10.2 文库构建
1.10.3 生物信息分析
1.10.4 统计分析
1.11 数据处理
2 结果与分析
2.1 血清和十二指肠中蛋白含量的变化
2.1.1 血清中TP和ALB含量的变化
2.1.2 十二指肠中TP和ALB含量的变化
2.2 十二指肠中氧化与抗氧化指标的变化
2.3 十二指肠中通透性相关指标的变化
2.4 DON与AFB1单一及联合染毒对紧密连接蛋白Occludin和ZO-1mRNA表达量的影响
2.5 肠道菌群多样性变化
2.5.1 小鼠肠道菌群物种丰度及多样性
2.5.2 小鼠粪便样本物种累计曲线图分析
2.5.3 OTUVenn图分析
2.5.4 物种Alpha多样性分析
2.5.5 小鼠肠道菌群结构
3 讨论
3.1 DON与AFB1单一及联合染毒对小鼠血清和肠道蛋白含量的影响
3.2 DON与AFB1单一及联合染毒对小鼠肠道氧化与抗氧化功能的影响
3.3 DON与AFB1单一及联合染毒对小鼠肠道通透性的影响
3.3.1 DON与AFB1单一及联合染毒对小鼠肠道中DAO活性的影响
3.3.2 DON与AFB1单一及联合染毒对小鼠肠道中IL-4水平的影响
3.3.3 DON与AFB1单一及其联合染毒对小鼠肠道中补体C3和补体C4的影响
3.4 DON与AFB1单一及联合染毒对小鼠肠道紧密连接蛋白Occludin和ZO-1mRNA表达量的影响
3.5 DON与AFB1单一及联合染毒对小鼠肠道菌群多样性的影响
4 结论
参考文献
附录 A
附录 B
作者简介
本文编号:3877248
【文章页数】:65 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
致谢
中文摘要
ABSTRACT
缩写和符号清单
文献综述
引言
1 材料与方法
1.1 试验动物
1.2 试验材料与仪器
1.3 试验溶液的配制
1.4 试验动物的分组及饲养管理
1.4.1 试验动物分组
1.4.2 试验动物饲养管理
1.5 样品的采集与处理
1.6 血清和十二指肠中蛋白含量的测定
1.7 十二指肠中氧化与抗氧化指标的测定
1.8 十二指肠中通透性相关指标的测定
1.9 回肠紧密连接蛋白Occludin和ZO-1mRNA表达量的测定
1.9.1 RNA的抽提(操作均在4℃进行)
1.9.2 逆转录合成cDNA
1.9.3 实时定量PCR
1.10 肠道菌群多样性变化检测
1.10.1 样品检测
1.10.2 文库构建
1.10.3 生物信息分析
1.10.4 统计分析
1.11 数据处理
2 结果与分析
2.1 血清和十二指肠中蛋白含量的变化
2.1.1 血清中TP和ALB含量的变化
2.1.2 十二指肠中TP和ALB含量的变化
2.2 十二指肠中氧化与抗氧化指标的变化
2.3 十二指肠中通透性相关指标的变化
2.4 DON与AFB1单一及联合染毒对紧密连接蛋白Occludin和ZO-1mRNA表达量的影响
2.5 肠道菌群多样性变化
2.5.1 小鼠肠道菌群物种丰度及多样性
2.5.2 小鼠粪便样本物种累计曲线图分析
2.5.3 OTUVenn图分析
2.5.4 物种Alpha多样性分析
2.5.5 小鼠肠道菌群结构
3 讨论
3.1 DON与AFB1单一及联合染毒对小鼠血清和肠道蛋白含量的影响
3.2 DON与AFB1单一及联合染毒对小鼠肠道氧化与抗氧化功能的影响
3.3 DON与AFB1单一及联合染毒对小鼠肠道通透性的影响
3.3.1 DON与AFB1单一及联合染毒对小鼠肠道中DAO活性的影响
3.3.2 DON与AFB1单一及联合染毒对小鼠肠道中IL-4水平的影响
3.3.3 DON与AFB1单一及其联合染毒对小鼠肠道中补体C3和补体C4的影响
3.4 DON与AFB1单一及联合染毒对小鼠肠道紧密连接蛋白Occludin和ZO-1mRNA表达量的影响
3.5 DON与AFB1单一及联合染毒对小鼠肠道菌群多样性的影响
4 结论
参考文献
附录 A
附录 B
作者简介
本文编号:3877248
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