鸡源沙门氏菌的分离鉴定、致病性分析及其对雏鸡肠道水通道蛋白影响

发布时间：2024-01-21 14:43

　　沙门氏菌是常见的食源性人畜共患病病原菌之一,能够引起人类和禽畜产生腹泻等炎症反应,严重感染会导致败血症甚至危及生命。此种危害,给人类安全和养殖业的经济都带来了严重威胁。肠道是机体重要的水盐代谢器官之一。研究表明,AQPs在肠道异常表达会使肠道对水分的吸收产生不同程度的影响。因此水通道蛋白的表达变化对肠道水转运影响一直是研究重点,但是目前报道主要集中在人类、大鼠和小鼠这类哺乳动物中,对于沙门氏菌侵袭后,雏鸡肠道内水通道蛋白表达的研究还是盲点。本研究首先通过沙门氏菌PCR鉴定、生化鉴定、血清型检测及毒力基因检测等方法对吉林省内部分地区养鸡场沙门氏菌进行了分离鉴定。而后通过口服攻毒实验、观察临床变化、及HE染色等方法,验证分离出的沙门氏菌分离株及沙门氏菌标准株对雏鸡致病性的影响。最后对雏鸡肠道存在的水通道蛋白基因进行检测,口服攻毒1日、3日、5日、7日后,用荧光定量PCR方法对雏鸡肠道水通道蛋白基因水平变化进行检测。实验结果如下:1、成功分离出7株沙门氏菌,健康鸡、病死鸡分离率分别为7%、4%;符合沙门氏菌生化特征;血清型鉴定显示,7株分离菌属于沙门氏菌D群;7株沙门氏菌SPI-2缺失。2、...

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
前言
第一篇 文献综述
    第一章 沙门氏菌研究进展
        1.1 沙门氏菌的概述
        1.2 沙门氏菌的分类
        1.3 沙门氏菌的抗原特征
        1.4 沙门氏菌的毒力研究
        1.5 沙门氏菌的流行病学及感染症状
        1.6 沙门氏菌的致病机制
        1.7 沙门氏菌的预防
    第二章 鸡水通道蛋白研究进展
        2.1 水通道蛋白概述
        2.2 鸡不同部位的AQPs研究进展
            2.2.1 鸡泌尿系统的AQPs及其功能
            2.2.2 鸡消化系统的AQPs及其功能
            2.2.3 生殖系统的AQPs及其功能
            2.2.4 其他部位的AQPs及其功能
        2.3 展望
第二篇 研究内容
    第一章 沙门氏菌分离鉴定及毒力基因检测
        1.1 材料(菌株、仪器、试剂、试剂配制)
            1.1.1 菌株及病料
            1.1.2 仪器
            1.1.3 试剂
            1.1.4 试剂配方
        1.2 方法
            1.2.1 样本采集
            1.2.2 沙门氏菌的分离纯化
            1.2.3 沙门氏菌PCR鉴定
            1.2.4 沙门氏菌生化鉴定
            1.2.5 沙门氏菌血清型鉴定
            1.2.6 沙门氏菌毒力基因鉴定
        1.3 结果与分析
            1.3.1 沙门氏菌分离结果
            1.3.2 沙门氏菌生化鉴定结果
            1.3.3 沙门氏菌血清型鉴定结果
            1.3.4 毒力基因检测结果
        1.4 讨论
        1.5 小结
    第二章 沙门氏菌对雏鸡致病性研究
        2.1 材料
            2.1.1 菌株及雏鸡
            2.1.2 仪器
            2.1.3 试剂
            2.1.4 试剂配方
        2.2 方法
            2.2.1 菌种培养细菌平板计数
            2.2.2 腹腔及口服接种
            2.2.3 沙门氏菌致死率统计
            2.2.4 沙门氏菌对雏鸡体重的影响
            2.2.5 临床症状及剖检变化观察
            2.2.6 HE染色及显微镜观察
        2.3 结果与分析
            2.3.1 平板计数结果
            2.3.2 腹腔接种致死率结果
            2.3.3 体重增长曲线
            2.3.4 临床症状及剖检变化结果
            2.3.5 HE染色结果
        2.4 讨论
        2.5 小结
    第三章 水通道蛋白在雏鸡肠道中的表达检测
        3.1 材料(菌株、仪器、试剂、试剂配制)
            3.1.1 内脏样本
            3.1.2 仪器
        3.2 方法
            3.2.1 RNA提取
            3.2.2 RNA反转录成cDNA
            3.2.3 荧光定量PCR检测雏鸡水通道蛋白基因的表达
            3.2.4 沙门氏菌感染后雏鸡肠道水通道蛋白变化
        3.3 结果与分析
            3.3.1 RNA浓度及纯度结果
            3.3.2 雏鸡十二指肠AQPs基因表达检测结果
            3.3.3 沙门氏菌感染后雏鸡十二指肠AQPs基因变化结果
        3.4 讨论
        3.5 小结
结论
参考文献
作者简介
致谢



本文编号：3882183