一个大白猪群肌纤维性状的测定及其与候选基因SNP的关联分析
发布时间:2024-01-30 09:49
生猪养殖产业在我国畜牧业中占据着十分重要的地位,猪肉成为我国主要的肉制品来源。随着人们生活水平的提高,对猪肉的需求不再仅仅是量的满足,更大的是对肉品质要求的改善。猪肉品质的改善已经成为猪遗传育种学研究的热点问题。肌纤维是构成肌肉的基本单位,肌纤维特性直接影响到肉质的好坏。肌肉的食用特性(嫩度、风味、多汁性)与肌纤维数目、肌纤维直径、肌纤维面积、肌纤维类型以及肌内脂肪(IMF)含量密切相关。通过研究个体肌纤维性状的差异,从分子遗传角度找到影响肌肉发育的相关基因,能更好地在实践中指导育种,取得最佳的经济效益。 本研究基于一个纯种大白资源群体,利用HE染色法对猪群肌纤维直径、面积进行测定,结合分子生物学、生物统计学以及群体遗传学等方法对Lpin1、BTG3基因进行了SNP检测及与肌纤维短径、长径、直径、肌纤维面积等性状的关联分析。同时通过免疫组化方法用Image Pro Plus6.0图像处理软件测得了11个个体的肌纤维快慢肌比例,并且通过Real-Time PCR技术验证了这11个个体的慢肌narker基因MYH7的表达量。取得如下结果: (1)测定了118头纯种大白背最长肌肌纤维性状指标...
【文章页数】:66 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
缩略词表
1 前言
1.1 研究问题的由来
1.2 肌肉的组织学结构及特性
1.3 肌纤维性状与肉质以及胴体性状的关系
1.4 部分肌纤维性状相关候选基因研究进展
1.4.1 肌纤维直径、面积的候选基因的研究进展
1.4.2 肌纤维类型相关基因的研究进展
1.4.3 本研究中两个候选基因的研究进展
1.5 本研究的目的和意义
2 材料和方法
2.1 材料
2.1.1 用于性状关联分析的猪群和DNA样品
2.1.2 用于检测慢肌标志基因MYH7的cDNA样品
2.1.3 主要试剂
2.1.4 主要试剂的配制
2.1.5 主要仪器设备
2.1.6 主要分子生物学软件
2.1.7 主要图像分析处理软件与统计软件
2.1.8 主要网站及数据库
2.2 方法
2.2.1 本研究的技术路线
2.2.2 石蜡切片的制备
2.2.3 苏木素伊红染色(HE染色)进行肌纤维面积、直径的测量统计
2.2.4 免疫组化法(IHC)区分快慢肌肌纤维以及快慢肌纤维比例的统计
2.2.5 耳样DNA的提取及质量检测
2.2.6 组织样背最长肌Total RNA的提取及质量检测
2.2.7 RNA反转录为cDNA
2.2.8 荧光定量标准品的制备
2.2.9 引物设计及PCR扩增
2.2.10 基因多态性与性状间的关联分析
2.2.11 荧光定量PCR检测慢肌肌纤维标志基因表达水平
3 结果
3.1 肌纤维直径、面积的测量统计及相关基因的多态性验证
3.1.1 肌纤维直径、面积的测量统计
3.1.2 肌纤维直径、面积以及肉质性状之间的相关性分析
3.1.3 Lpin1基因在大白猪群体中的多态性检测及关联分析
3.1.4 BTG3基因在大白猪群体中的多态性检测及关联分析
3.2 肌纤维快慢肌比例的测量统计及绝对定量的验证
3.2.1 肌纤维快慢肌比例的测量统计
3.2.2 荧光定量PCR检测慢肌标记基因MYH7表达水平
4 讨论
4.1 关于肌纤维直径、面积测量统计的讨论
4.2 Lpin1基因性状关联分析的讨论
4.3 BTG3基因性状关联分析的讨论
4.4 关于肌纤维快慢肌比例测量统计的讨论
4.5 关于荧光定量PCR检测快慢肌比例结果的讨论
5 小结
5.1 本研究的主要结果与结论
5.2 本研究的创新点与特色
5.3 本研究的不足与进一步工作的建议
参考文献
致谢
本文编号:3889920
【文章页数】:66 页
【学位级别】:硕士
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摘要
ABSTRACT
缩略词表
1 前言
1.1 研究问题的由来
1.2 肌肉的组织学结构及特性
1.3 肌纤维性状与肉质以及胴体性状的关系
1.4 部分肌纤维性状相关候选基因研究进展
1.4.1 肌纤维直径、面积的候选基因的研究进展
1.4.2 肌纤维类型相关基因的研究进展
1.4.3 本研究中两个候选基因的研究进展
1.5 本研究的目的和意义
2 材料和方法
2.1 材料
2.1.1 用于性状关联分析的猪群和DNA样品
2.1.2 用于检测慢肌标志基因MYH7的cDNA样品
2.1.3 主要试剂
2.1.4 主要试剂的配制
2.1.5 主要仪器设备
2.1.6 主要分子生物学软件
2.1.7 主要图像分析处理软件与统计软件
2.1.8 主要网站及数据库
2.2 方法
2.2.1 本研究的技术路线
2.2.2 石蜡切片的制备
2.2.3 苏木素伊红染色(HE染色)进行肌纤维面积、直径的测量统计
2.2.4 免疫组化法(IHC)区分快慢肌肌纤维以及快慢肌纤维比例的统计
2.2.5 耳样DNA的提取及质量检测
2.2.6 组织样背最长肌Total RNA的提取及质量检测
2.2.7 RNA反转录为cDNA
2.2.8 荧光定量标准品的制备
2.2.9 引物设计及PCR扩增
2.2.10 基因多态性与性状间的关联分析
2.2.11 荧光定量PCR检测慢肌肌纤维标志基因表达水平
3 结果
3.1 肌纤维直径、面积的测量统计及相关基因的多态性验证
3.1.1 肌纤维直径、面积的测量统计
3.1.2 肌纤维直径、面积以及肉质性状之间的相关性分析
3.1.3 Lpin1基因在大白猪群体中的多态性检测及关联分析
3.1.4 BTG3基因在大白猪群体中的多态性检测及关联分析
3.2 肌纤维快慢肌比例的测量统计及绝对定量的验证
3.2.1 肌纤维快慢肌比例的测量统计
3.2.2 荧光定量PCR检测慢肌标记基因MYH7表达水平
4 讨论
4.1 关于肌纤维直径、面积测量统计的讨论
4.2 Lpin1基因性状关联分析的讨论
4.3 BTG3基因性状关联分析的讨论
4.4 关于肌纤维快慢肌比例测量统计的讨论
4.5 关于荧光定量PCR检测快慢肌比例结果的讨论
5 小结
5.1 本研究的主要结果与结论
5.2 本研究的创新点与特色
5.3 本研究的不足与进一步工作的建议
参考文献
致谢
本文编号:3889920
本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3889920.html