猪肺炎支原体山西株的分离与鉴定

发布时间：2024-02-14 00:26

　　研究旨在获得猪肺炎支原体山西地方株,以期补充猪肺炎支原体山西地方株的菌株信息,为山西猪支原体肺炎的诊断及防治提供理论依据。将具有猪支原体肺炎典型病理特征的肺脏剪成米粒大小,放入KM2液体培养基,盲传培养后在固体培养基中纯化培养,用16S rRNA和种特异性基因P36进行PCR检测,对P36扩增结果测序与登录NCBI GenBank的猪肺炎支原体进行同源性比较,并构建系统发育树。结果显示,液体培养基变色提示培养基中含有猪肺炎支原体;菌落中间暗、边缘光滑,呈典型的"煎蛋样",大小0.2μm左右,生理生化特性符合支原体特性;16S r RNA和P36基因经PCR扩增确认分离菌株为猪肺炎支原体,并命名为JZ01株。JZ01株是从山西最近发病且致病性严重的猪肺中分离而来,其不仅能成功适应人工培养基,而且传代生长良好,为潜在的疫苗菌株。

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【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
        1.1.1 病料采集
        1.1.2 主要试剂及仪器
    1.2 方法
        1.2.1 临床症状与组织病理变化观察
        1.2.2 病原体分离
        1.2.3 形态学观察
        1.2.4 生化特性鉴定
        1.2.5 分离株PCR鉴定
            1.2.5. 1 16S r RNA基因PCR扩增
            1.2.5. 2 P36基因PCR扩增
        1.2.6 菌落PCR鉴定
        1.2.7 测序及序列分析
2 结果与分析
    2.1 组织病理变化结果
    2.2 分离培养结果
    2.3 形态学观察结果
    2.4 生化特性分析
    2.5 PCR鉴定结果
    2.6 序列比对结果
3 结论与讨论



本文编号：3897453