四种抗氧化剂对山羊精液冷冻保存效果的影响

发布时间：2017-05-25 09:03

  本文关键词：四种抗氧化剂对山羊精液冷冻保存效果的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：精液冷冻保存技术的发展解决了精液长期保存的问题,使采精和受精在时间和空间上产生了分离,延长了精子的体外储存时间,便于长途运输,促进了遗传资源跨地区、跨国界的交流和共享,加快了畜群品种改良步伐,缩短了品种改良周期。在冷冻过程中,精子会遭受不同程度的氧化损伤,导致精液品质下降,使得羊精液冷冻保存技术还没有得到大范围的推广。大量研究证明,在精液冷冻稀释液中补充抗氧化剂能够提高冻融后的精液品质。本试验以番茄红素、α-硫辛酸、海带多糖和枸杞多糖等作为抗氧化剂初步探究添加不同浓度的抗氧化剂对山羊精液的冷冻保护作用。本研究获得的主要结果如下:1.在山羊精液冷冻基础液中分别添加番茄红素和α-硫辛酸能够有效提高冻融后精子活率、顶体完整率、质膜完整率和线粒体活性等。与其他处理组相比,基础液中添加1.0 mg/mL的番茄红素和10μg/mL的α-硫辛酸效果最好,显著提高了精子活率(52.04%和50.71%)、顶体完整率(51.33%和50.23%)、质膜完整率(53.57%和49.12%)和线粒体活性(49.31%和47.46%)(P0.05)。0.5 mg/mL的番茄红素组和2.0 mg/mL的番茄红素组以及5μg/mL的α-硫辛酸组和15μg/mL的α-硫辛酸组对山羊冻精的保存效果次之,4.0 mg/mL的番茄红素组和2.0μg/mL的α-硫辛酸组与对照组差异不显著(P0.05)。2.在山羊精液冷冻基础液中联合添加番茄红素和α-硫辛酸能够有效改善冻融后精子活率、顶体完整率、质膜完整率和线粒体活性,与单独添加番茄红素组和α-硫辛酸组相比,1.0 mg/mL番茄红素和5μg/mL的α-硫辛酸组合组冷冻保存效果最好,精子活率、顶体完整率、质膜完整率和线粒体活性分别达到53.30%、53.77%、53.99%和50.94%(P0.05);0.5 mg/mL的番茄红素和5μg/mL的α-硫辛酸组合组与1.0 mg/mL番茄红素和5μg/mL的α-硫辛酸组合组无显著差异(P0.05);0.5 mg/mL的番茄红素和5μg/mL的α-硫辛酸组合组及1.0 mg/mL的番茄红素和10μg/mL的α-硫辛酸组合组则与单独添加组无显著差异(P0.05)。3.在山羊精液冷冻基础液中分别添加海带多糖和枸杞多糖能够有效提高冻融后精子活率、顶体完整率、质膜完整率和线粒体活性等指标。与其他处理组相比,基础液中添加1.0 mg/mL的海带多糖和4.0 mg/mL的枸杞多糖效果最好,显著提高了精子活率(47.79%和49.56%)、顶体完整率(49.68%和49.87%)、质膜完整率(50.59%和48.07%)和线粒体活性(48.72%和49.32%)(P0.05),但是高浓度的海带多糖(4.0 mg/mL)和枸杞多糖(8.0 mg/mL)对山羊冻精的保护效果与对照组无显著差异(P0.05)。4.在山羊精液冷冻基础液中联合添加海带多糖和枸杞多糖能够有效改善冷冻解冻后山羊精子活率、顶体完整率、质膜完整率和线粒体活性,其中1.0 mg/mL海带多糖和2.0 mg/mL枸杞多糖组合组效果显著优于单独添加组(P0.05),精子活率、顶体完整率、质膜完整率和线粒体活性分别达到51.01%、52.76%、54.35%和51.39%;但是联合添加海带多糖和枸杞多糖对冻融后精子线粒体活性不会产生影响,高浓度组合组(1.0mg/mL海带多糖和4.0 mg/mL枸杞多糖)与单独添加组差异不显著(P0.05)。5.在山羊精液冷冻基础液中单独添加番茄红素和α-硫辛酸以及海带多糖和枸杞多糖均能有效提高SOD、CAT、GSH-Px三种抗氧化酶的活性,与对照组相比,1.0 mg/mL的番茄红素、10μg/mL的α-硫辛酸、1.0 mg/mL的海带多糖和4.0 mg/mL的枸杞多糖效果最好(P0.05);联合添加组也能有效提高SOD、CAT、GSH-Px三种抗氧化酶的活性,其中1.0 mg/mL番茄红素和5μg/mL的α-硫辛酸组合组以及1.0 mg/mL海带多糖和2.0 mg/mL枸杞多糖组合组对山羊精子的冷冻保护效果显著优于单独添加组(P0.05)。
【关键词】：山羊精液 冷冻保存 抗氧化剂 精液品质
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S827
【目录】：

• 摘要6-8
• ABSTRACT8-13
• 文献综述13-26
• 第一章 羊精液冷冻保存技术研究进展13-19
• 1.1 羊精液冷冻技术研究概况13-14
• 1.2 精液冷冻保存原理14
• 1.3 精子冷冻损伤机制14-15
• 1.4 影响羊精液冷冻保存效果的因素15-18
• 1.4.1 冷冻稀释液15-16
• 1.4.2 冷冻保护剂16-17
• 1.4.3 冷冻程序17-18
• 1.5 羊精液冷冻保存技术展望18-19
• 第二章 精子氧化损伤机制及抗氧化剂的分类19-26
• 2.1 精子氧化损伤机制19-20
• 2.1.1 活性氧（ROS）概述19
• 2.1.2 精液中ROS的来源19-20
• 2.1.3 ROS对精子的损伤20
• 2.2 抗氧化剂的分类20-24
• 2.2.1 酶类抗氧化剂21-22
• 2.2.2 非酶类抗氧化剂22-24
• 2.3 本研究的目的和意义24-26
• 试验研究26-51
• 第三章 番茄红素和 α-硫辛酸对山羊精液冷冻保存效果的影响26-34
• 3.1 材料与方法26-29
• 3.1.1 主要试剂与仪器设备26-27
• 3.1.2 试验动物27
• 3.1.3 主要溶液的配制27
• 3.1.4 精液处理27-28
• 3.1.5 试验设计28
• 3.1.6 精子品质检测28-29
• 3.1.7 数据统计分析29
• 3.2 结果与分析29-31
• 3.2.1 番茄红素对山羊精液冷冻保存效果的影响29-30
• 3.2.2 α-硫辛酸对山羊精液冷冻保存效果的影响30
• 3.2.3 番茄红素和 α-硫辛酸联合添加对山羊精液冷冻保存效果的影响30-31
• 3.3 讨论31-33
• 3.4 小结33-34
• 第四章 海带多糖和枸杞多糖对山羊精液冷冻保存效果的影响34-41
• 4.1 材料与方法35-36
• 4.1.1 主要试剂与仪器设备35
• 4.1.2 试验动物35
• 4.1.3 主要溶液的配制35
• 4.1.4 精液处理35
• 4.1.5 试验设计35
• 4.1.6 精子品质检测35-36
• 4.1.7 数据统计分析36
• 4.2 结果与分析36-38
• 4.2.1 海带多糖对山羊精液冷冻保存效果的影响36-37
• 4.2.2 枸杞多糖对山羊精液冷冻保存效果的影响37
• 4.2.3 海带多糖和枸杞多糖联合添加对山羊精液冷冻保存效果的影响37-38
• 4.3 讨论38-40
• 4.4 小结40-41
• 第五章 不同抗氧化剂对山羊精子冻后SOD、CAT和GSH-Px活性的影响41-51
• 5.1 材料与方法42
• 5.1.1 主要试剂与仪器设备42
• 5.1.2 试验动物42
• 5.1.3 主要溶液的配制42
• 5.1.4 精液处理42
• 5.1.5 试验设计42
• 5.1.6 精子抗氧化酶活性的测定42
• 5.1.7 数据统计分析42
• 5.2 结果与分析42-49
• 5.2.1 番茄红素和 α-硫辛酸对山羊精子冻后SOD、CAT和GSH-Px活性的影响42-46
• 5.2.2 海带多糖和枸杞多糖对山羊精子冻后SOD、CAT和GSH-Px活性的影响46-49
• 5.3 讨论49-50
• 5.4 小结50-51
• 结论51
• 创新点51-52
• 参考文献52-62
• 致谢62-63
• 作者简介63

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