基于TaqMan探针的A型塞尼卡病毒荧光定量RT-PCR方法的建立及应用

发布时间：2024-04-08 03:33

　　为建立一种快速、特异、灵敏的A型塞尼卡病毒(SVA)检测方法,通过比对我国不同地区SVA流行毒株的VP1基因序列,在其保守区域设计了1组引物和探针,通过条件优化,建立了基于TaqMan探针的荧光定量RT-PCR检测方法。用该方法检测口蹄疫病毒、猪瘟病毒、日本脑炎病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒等均不发生交叉反应。敏感性分析显示,该方法的最低检出量为278拷贝/μL,比常规RT-PCR的灵敏度高100倍。重复性分析显示,所建立方法的批内变异系数为0.3%～1.0%,批间变异系数为0.8%～2.0%,具有良好的稳定性。进一步对16份疑似SVA感染的临床病料检进行了检测,结果显示8份为SVA核酸阳性。提示建立的检测方法可以用于临床SVA感染的鉴别诊断,为我国SVA的诊断和控制提供了良好的技术支撑。

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1材料与方法
    1.1材料
    1.2方法
2结果
    2.1引物序列的设计合成
    2.2质粒标准品的制备
    2.3荧光定量PCR反应条件的优化及标准曲线的绘制
    2.4特异性试验
    2.5敏感性试验
    2.6重复性试验
    2.7临床病料检测
3讨论



本文编号：3948425