头孢喹肟PK/PD参数量化金黄色葡萄球菌耐药性产生的网络机制研究

发布时间：2024-04-10 02:07

　　金黄色葡萄球菌是一种革兰氏阳性致病菌,可引起野生动物多种危及生命的疾病。头孢喹肟对金黄色葡萄球菌具有强效的抗菌活性,为探究其与耐药金黄色葡萄球菌选择性富集的关系及耐药性产生的网络机制,本试验采用体外PK/PD模型研究头孢喹肟不同给药方案下耐药性产生和富集的关系,同时对耐药菌差异表达蛋白进行定量性测定、筛选和分析,以初步阐明其对头孢喹肟的耐药机制。本试验以头孢喹肟精制品、金黄色葡萄球菌ATCC6538为材料,具体步骤如下:1构建体外PK/PD模型,模型采用消除半衰期为2.5 h或5 h时,给药间隔12 h或24 h时3 μg/mL、5 μg/mL、10 μg/mL不同给药浓度的方案给药。每周期运行时长为72 h,期间于不同时间点采集模型内肉汤样品用于药物浓度和细菌含量的测定。2利用含药平板筛选同一给药方案下首先出现2 MIC耐药的低浓度耐药株、8 MIC耐药的高浓度耐药株与标准敏感菌株进行Labelfree定量蛋白质组学试验(n=3)。通过GO分析、KEGG通路富集分析、PPI网络分析,筛选出差异表达蛋白及论证其相互关系,以便更好的了解耐药菌的进化历程和耐药相关蛋白的网络作用机制。研究结...

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图３体外ＰＫ／ＰＤ模型??Ｆｉｇ．?３?ＰＫ／ＰＤ?ｍｏｄｅｌ?ｉｎ?ｖｉｔｒｏ??

３．３体外ＰＫ／ＰＤ模型的构建??３．３．１搭建模型??如图３，带橡胶塞的双层大烧杯为整个模型的中央室，磁力搅拌器在底下不停搅??拌；最右方棕黑色瓶中储存有新鲜肉汤，并由蠕动泵其中一孔泵入中央室，蠕动泵另??一孔以相同速率泵出等量的培养基，从而实现中央室内药物的指数递减。整个实验....

图５?ＰＫ／ＰＤ模型中头孢唾后的髙效液相色谱图??Ｆｉｇ．?５?Ｔｈｅ?ＨＰＬＣ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｃｅｆｑｕｉｎｏｍｅ?ｉｎ??

??质峰分离良好，且均为基线分离峰。空白对照组在６？８?ｍｉｎ间无干扰峰出现，如图５，??证明该检测方法特异性良好，可用于后续试验。??ｍＭＪ?????ＺＸ＞－?????？ｓ－??????????????〇〇?ｖ〇?２０?３０?４０?ｉＯ?６０?７〇?６０?Ｍ?１００?１１０?１....

图8三组菌株间鉴定到的韦恩图

Ｆｉｇ．８?Ｖｅｎｎ?ｄｉａｇｒａｍ?ｂｅｔｗｅｅｎ?ｔｈｅ?ｔｈｒｅｅ?ｇｒｏｕｐｓ??达蛋白的筛选??化人于２．０倍（ｉ：调人于２倍或者下调小于０．５?）?ｔｉ?（ｐ?＜?０．蛋［＇Ｊ质，各比较组的差异表达蛋白质数ＦＩ见表２６，同时，为今：值，＞）ｉｉ?Ｌ所心数据均为卞值的差....

本文编号：3949978