鸡BRD2亚细胞定位及其组织表达特性分析

发布时间：2024-04-10 03:33

　　【目的】明确含溴结构域蛋白2(BRD2)的亚细胞定位及其表达特征,为后续研究BRD2基因调控鸡组织发育的作用机制提供参考依据。【方法】通过构建鸡BRD2基因重组真核表达载体pEGFP-BRD2,转染人胚胎肾细胞(HEK-293T)后检测重组蛋白EGFP-BRD2的表达情况及亚细胞定位;利用实时荧光定量PCR分别检测鸡胚14胚龄(E14 d)、鸡出壳后1日龄(1 d)、7日龄(7 d)和14日龄(14 d)4个时间点各组织中BRD2基因的表达情况。【结果】重组真核表达载体pEGFP-C1-BRD2转染HEK-293T细胞获得的融合蛋白EGFP-BRD2约115.00 kD,且主要定位在细胞核。实时荧光定量PCR检测结果表明,鸡BRD2基因在E14 d和1 d肌胃中的相对表达量最高,在7和14 d肺脏中的相对表达量最高。BRD2基因在各组织的表达规律为:在眼球内E14 d到14 d的表达先下降后趋于稳定;在脑组织和心脏内的表达在E14 d至14 d间呈先下降后上升的变化趋势;在肝脏内E14 d表达稳定,1 d后开始逐渐增加,至14 d时达最高值;在肺脏中E14 d的表达下降,1 d后急剧上...

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【文章目录】：
0 引言
1 材料与方法
    1.1 供试动物
    1.2 细胞、载体和试剂
    1.3 引物合成
    1.4 重组真核表达载体p EGFP-BRD2构建
    1.5 融合蛋白表达分析
    1.6 融合蛋白亚细胞定位分析
    1.7 总RNA提取及c DNA合成
    1.8 BRD2基因在鸡不同发育阶段各组织中的表达分析
    1.9 统计分析
2 结果与分析
    2.1 重组真核表达载体p EGFP-BRD2鉴定结果
    2.2 融合蛋白表达分析结果
    2.3 融合蛋白亚细胞定位分析结果
    2.4 BRD2基因在鸡不同发育阶段各组织中的表达规律分析结果
3 讨论
4 结论



本文编号：3950081