山羊STING和TBK1基因组织特异性表达和分布的研究

发布时间：2024-05-27 00:14

　　干扰素刺激基因(STING)和TANK结合激酶1(TBK1)是介导宿主Ⅰ型干扰素抗病毒应答的关键因子。为深入研究STING和TBK1在山羊天然免疫应答中的作用,采用RT-qPCR方法进行了STING和TBK1组织特异性表达检测,并进行了其组织分布的研究。由于物种差异较大,缺乏山羊STING的商品化抗体,本试验首先利用原核表达的STING蛋白制备了多克隆抗体。结果显示,利用原核表达的STING重组蛋白免疫新西兰大白兔后,经ELISA和Western-blot证明获得了特异性好的多克隆抗体。组织特异性表达检测结果显示,STING在肠系膜淋巴结、心脏和脾的相对表达水平较高,而TBK1在大脑、肝、心脏和肾的相对表达水平较高。免疫组织化学检测结果显示,在心肌细胞、肝细胞、淋巴细胞、细支气管上皮细胞、肾小管上皮细胞和大脑皮层神经元中均呈STING和TBK1阳性。研究结果为进一步探索STING和TBK1在山羊天然免疫应答中的作用提供了基础数据。

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【部分图文】：

图1pET-30a(＋)－STING的诱导和纯化蛋白SDS-PAGE及Western-blot分析

中国兽医科学第50卷2.2海南黑山羊STING和TBK1基因的实时荧光定量检测实时荧光定量PCR检测结果显示，海南黑山羊STING、TBK1和β-actin基因的熔解曲线峰平滑、单一、扩增特异性好。STING和TBK1基因在所有检测组织中均有表达，其中STING基因在肠系膜淋巴结....

图2海南黑山羊STING（A）和TBK1（B）在各组织中相对表达Figure2TherelativeexpressionlevelsofSTING(A)andTBK10STI1234567

中国兽医科学第50卷2.2海南黑山羊STING和TBK1基因的实时荧光定量检测实时荧光定量PCR检测结果显示，海南黑山羊STING、TBK1和β-actin基因的熔解曲线峰平滑、单一、扩增特异性好。STING和TBK1基因在所有检测组织中均有表达，其中STING基因在肠系膜淋巴结....

图3海南黑山羊STING和TBK1蛋白组织特异性的分布

第8期张彭涛等：山羊STING和TBK1基因组织特异性表达和分布的研究胞中的阳性定位与STING蛋白相似，两者之间阳性表达程度不同（图3H、I、J、K、L、M和N）。3讨论STING和TBK1是细胞抗病毒反应的核心因子，在Ⅰ型IFN诱导中起关键作用。关于STING和TBK1的研究....

本文编号：3982496