维氏气单胞菌TH0426株CpxR/CpxA双组分缺失株的构建及相关生物学特性的分析

发布时间：2024-06-01 02:39

　　维氏气单胞菌(Aeromonas veronii,A.veronii)是一种可引起人、兽及水生生物共患病原菌,近些年来有关报道不断增加被多个国家将其列为水体质量和食品安全的重点检查对象,国内外有关A.veronii的研究大多集中在分离鉴定和常见毒力因子的检测,而对其致病机制方面的研究鲜有报道,有研究表明,Cpx双组分调控系统广泛存在于革兰氏阴性菌中,并在细菌致病性方面发挥着重要的调控作用,但在A.veronii中的研究尚未见报导,本文通过研究Cpx双组分系统中相关基因的功能,推测其在A.veronii的调控作用,有助于我们进一步了解A.veronii的致病机制。利用基因敲除技术对A.VTH0426 Cpx双组分中的cpxA和cpxR基因进行缺失株与回补株的构建,与野生株相关生物学性状进行对比分析发现,△cpxA和△cpxR与野生株性比,细菌生长状态、溶血性、理化特性及药敏试验无明显变化,在应激耐受实验中,模拟高渗透压及氧化应激结果显示:△cpxA的耐受能力低于△cpxR且二者均显著低于野生株,模拟酸性条件下,△cpxA的耐受能力高于△cpxR但仍低于野生株,模拟碱性条件下,△cpxR的...

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.1cpxA基因扩增结果验证A:TH0426DNA检测B:cpxA上游部分基因序列（UcpxA）；C:cpxA下游部分基因序列（D

图1.1cpxA基因扩增结果验证A:TH0426DNA检测B:cpxA上游部分基因序列（UcpxA）；C:cpxA下游部分基因序列（DcpxA）;D:cpxA上下游基因连接序列（UDcpxA）;E:pEASY-UDcpxAPCR质粒鉴定Fi....

图1.2pRE112-UDcpxA构建结果

图1.1cpxA基因扩增结果验证26DNA检测B:cpxA上游部分基因序列（UcpxA）；C:cpxA下游部分基因序列）;D:cpxA上下游基因连接序列（UDcpxA）;E:pEASY-UDcpxAPCR质粒鉴Fig.1.1Valida....

图1.3△cpxA构建鉴定结果

P1-1/P1-4进行菌落PCR鉴定并送Taraka公司测序，该步PCR可能出现的结果：当重组自杀性质粒pRE112-UDcpxA在A.veroniiTH0426的基因组成功整合时，PCR扩增结果一定机率出项两段目的基因片段，其中一条目的基因片段U....

图1.6pRE112-UDcpxR构建结果

图1.5cpxR基因扩增结果验证:cpxR上游部分基因序列（UcpxR）；B:cpxR下游部分基因序列（DcpxR）;C:cpxR上游基因连接序列（UDcpxR）;D:pEASY-UDcpxRPCR质粒鉴定Fig.1.5Validation....

本文编号：3985440